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i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] 去除PCR产物中的模板 已有7人参与

可以用用第一次的PCR 产物,将其稀释1000倍后作为模板进行第二次PCR问题是直接用第二次的PCR产物转化,还需要胶回收第二次的PCR产物吗?
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王爱沫1

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

2楼2016-03-29 10:07:19
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i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 王爱沫1 at 2016-03-29 10:07:19
感觉不大懂你想表达的意思

敲除基因过吗

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-29 10:08:48
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4楼2016-03-29 10:17:08
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tongyanna

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
无论用那个模板都一样,不知道你想干什么,如果想量上增加的话可以多次
自己的路,自己快乐的走
5楼2016-03-29 10:17:30
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tongyanna

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by i760912798 at 2016-03-29 10:08:48
敲除基因过吗
...

敲除基因多是敲出个别基因片段吧
自己的路,自己快乐的走
6楼2016-03-29 10:21:04
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sihaiming

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以加入DpnI酶消化模板,再者,你不需要胶回收吧,直接PCR产物回收就可以
7楼2016-03-30 09:30:13
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原海亮

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这是在做质粒载体上的点突变么?

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
8楼2016-03-30 12:32:08
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最好是回收之后,浓缩再电转

发自小木虫IOS客户端
9楼2016-03-31 08:23:50
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aquamarineqp

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是连接转化的话,最好是胶回收,可以去除taq酶蛋白以及其他杂离子的影响,提高转化率。但是二次PCR不太好,扩增错误会成指数增长,直接用模板PCR胶回收就可以了。
要学会生物统计
10楼2016-04-02 09:07:40
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