应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » Hela细胞瞬时转染总是失败
51/1返回列表
查看: 2280  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lubov120451

新虫 (初入文坛)

[求助] Hela细胞瞬时转染总是失败 已有5人参与

我做的是hela细胞的瞬时转染，然后设了一个pccl-GFP组来观察转染效率，在转染24h于荧光显微镜下观察荧光，每次都只是几颗绿色荧光，按道理是成片的绿色荧光。使用的是脂质体转染，lip2000按照质粒：lip2000=1：2的比例加入，还希望大神指点，已经重复2次了，都是失败，找不到原因
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-03-28 10:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小土圆子

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你转的是什么质粒呢 我们实验室用的是293细胞
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-29 21:22:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以考虑下电转，实在不行，看看你实验室有没有其他可以用的表达载体或细胞吧。
赞一下 回复此楼
2楼2016-03-28 10:34:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ysk1989

新虫 (小有名气)
lipo2000的细胞毒性大，转染效率很低。我们实验室现在用的是英格恩生物的转染试剂。英格恩生物转染试剂的出现无疑是转染试剂领域的重大突破，纳米聚合物材料，细胞毒性低，转染效率高，远远超越脂质体。而且还很便宜，比lipo2000强多了。可以试一下。
赞一下 回复此楼
5楼2016-07-29 10:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼上应该没转进去，而且lipo2000毒性太大，不建议使用。Hela属于比较好转的细胞，我用RFect小核酸转染试剂做siRNA瞬时转染，可以做到90%以上的敲出效率，细胞死的比较少，还可以。
赞一下 回复此楼
6楼2018-10-17 14:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求材料，环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 材料调剂 +3 匹克i 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:18 by peike
[考研] 材料292调剂 +4 橘颂思美人 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:16 by peike
[考研] 材料专硕找调剂 +3 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:13 by peike
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +3 我爱学电池 2026-03-23 3/150 2026-03-23 17:16 by AZMK
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭