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喵喵小猫鱼

新虫 (初入文坛)

[求助] 重叠PCR产物有杂带且有片段缺失

用PCR插入20bp的小片段时,做两个小片段(约250bp和150bp)的重叠PCR。两个小片段都没有杂带,重叠后出现杂带,而且两个条带距离很近。三个不同的目的片段同时做,一个没有杂带,两个有杂带,经测序后发现,最后合成的片段,pcr显示有杂带的样品,原先150bp的小片段部分丢失约50bp。求助各位,请指教。
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