24小时热门版块排行榜    

查看: 3209  |  回复: 10

i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] 怎样提高电击感受态细胞的转化效率 已有5人参与

为提高电击转化效率,如果OD过低或过高都会使转化效率降低将导致实验的失败,怎样提高电击感受态细胞的转化效率
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

maixiaodaou

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电击转化杯提前遇冷,制作感受态时在菌液在它生长的对数期。

发自小木虫Android客户端
2楼2016-03-27 15:42:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-03-27 15:42:55
电击转化杯提前遇冷,制作感受态时在菌液在它生长的对数期。

你制备过电转感受态细胞吗,有具体步骤参考一下吧!

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-27 16:27:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maixiaodaou

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by i760912798 at 2016-03-27 16:27:54
你制备过电转感受态细胞吗,有具体步骤参考一下吧!
...

制备过,不知道你用什么菌,我用的农杆菌

发自小木虫Android客户端
4楼2016-03-27 21:17:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-03-27 21:17:46
制备过,不知道你用什么菌,我用的农杆菌
...

我用的是大肠杆菌,制备大肠杆菌的电击感受态细胞
5楼2016-03-28 08:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18716248350

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
大肠杆菌可以直接用化学转化啊,效率很高的!

发自小木虫Android客户端
6楼2016-03-28 16:50:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 18716248350 at 2016-03-28 16:50:32
大肠杆菌可以直接用化学转化啊,效率很高的!

1.1kb的线性片段可以用氯化钙制备的感受态细胞进行转化吗?
7楼2016-03-28 17:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

I-Believe

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
TSS法制备大肠杆菌感受态效率高于氯化钙发,转化后复苏也可用营养更高的soc替代LB

发自小木虫Android客户端
8楼2016-03-28 23:12:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hj200456

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是做基因敲除的吧。1.可以把感受态细胞做得浓一点,就是最后一步少加一点溶液。2.线性片段浓度弄高一点。
9楼2016-03-29 09:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hj200456 at 2016-03-29 09:58:56
你是做基因敲除的吧。1.可以把感受态细胞做得浓一点,就是最后一步少加一点溶液。2.线性片段浓度弄高一点。

你敲除过基因吗?制备的电转感受态细胞一般分装多少ul,另外,加入感受态细胞的线性片段的量多少合适?
10楼2016-03-29 10:11:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 i760912798 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:25 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 01:04 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-30 00:59 by winsaint
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 00:41 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 12/600 2026-08-30 00:31 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 3/150 2026-08-29 23:14 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
信息提示
请填处理意见