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求助大神!土壤DNA提取,扩不出条带。谢谢大家
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wyc661217
新虫
(初入文坛)
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专业: 环境微生物学
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求助
]
求助大神!土壤DNA提取,扩不出条带。谢谢大家
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目的是扩出土壤中的动物线粒体DNA,植物叶绿体DNA,拿去测序,搞多样性。
由于样品中DNA含量很低,所以没法用现成的试剂盒,用过power soil DNA isolation kit提出来的浓度大概只有0.2 ng/ul左右,反倒扩成功了,但由于大量的DNA在提取过程中被试剂带走,所以结果没什么用。
求助
1.有没有什么去除土壤提取物中pcr扩增抑制因子(腐殖质等)的方法;或者什么比较高效但损失少的土壤DNA提取方法。
2.有没有什么提高扩增成功率的方法(bsa,dmso都试过了,没有用)。
谢谢大家
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求助土壤总DNA提取和16S rDNA扩增
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1楼
2016-03-27 02:39:43
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饺子弟
铜虫
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虫号: 1838321
注册: 2012-05-29
专业: 微生物生理与生物化学
你可以搜索An yingfeng发表的关于土壤DNA提取方法的论文,那里方法很详细,我实验过很好用。
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2楼
2016-03-27 08:09:07
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doushifish
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
去腐殖酸常常加BSA或甘油
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3楼
2016-03-29 16:30:19
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doushifish
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虫号: 1077543
注册: 2010-08-19
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
有现成的PCR抑制物清除剂卖的
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4楼
2016-03-29 16:31:22
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quiller2000
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性别: GG
专业: 微生物资源与分类学
分离土壤中的线粒体?
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致良知
5楼
2018-06-24 13:26:32
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