| 查看: 870 | 回复: 5 | ||
[求助]
求助ELISA！！！
|
|
ELISA菜鸟一枚，正在做ELISA,遇到问题了，周围没有人做，只好来小木虫求助各位大神了。 我做的是检测乳粉的抗原性，现在在确定抗原的包被浓度，一抗和二抗的工作浓度。但是每次加入TMB后都没有显色。希望大神们帮忙分析一下有可能是什么原因。以下是我的实验步骤： 1、用包被液包被抗原（β-LG)，抗原浓度分别为0.5、2.5、10、25、50ug/ml,从左到右依次加入板中，100ul/孔，4℃过夜。 2、次日，用洗涤液洗板4次，甩干。 3、加封闭液进行封闭，37℃放置45min。 4、洗涤 5、将兔抗β-LG用洗涤液从1:500对倍稀释，从上到下依次加入板中，100ul/L，37℃温育1h. 6、洗涤 7、将HRP-羊抗兔IgG用洗涤液稀释，加入100ul/孔，37℃温育1h。 8、洗涤 9、将等体积的TMB A液和B液混合，取100ul/孔加入板内，37℃避光温育。 ps:包被液：pH9.6 0.05mol/L碳酸盐缓冲液 洗涤液：pH7.4 PBST 封闭液：PBS+1%BSA+0.1%Tween-20 希望大家多多帮助！！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
求助新西兰租房签证
已经有0人回复
-
葡萄糖溶液喷雾干燥
已经有4人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有154人回复
-
凯氏定氮测粗蛋白：空白管竟藏大秘密
已经有0人回复
-
Springer期刊投稿求助
已经有4人回复
-
不合理蛙科研实验：盐酸泡夜我的蛋白终溶出
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
夹心ELISA法，空白显示，求助！！
已经有9人回复- 求助！雌激素ELISA检测试剂盒~
已经有2人回复
- 看一篇文章上的competition ELISA图，实在是看不懂，上课要讲，紧急求助！！
已经有0人回复
- 求助各位大神解答！ELISA检测藻毒素试剂盒的相关问题。
已经有3人回复
- 求助!NGAL，KIM
已经有0人回复
- ELISA检测转基因大豆油！求助！！
已经有6人回复
- 审稿意见求助，关于ELISA法，谢谢！
已经有6人回复
- 【求助/交流】紧急求助！怎样提取脱落酸（Elisa法）？
已经有2人回复
- 文章等来小修，有个问题求助大家！
已经有3人回复
- 【求助/交流】求ELISA高手！~抗体的修饰技术
已经有8人回复
2楼2016-03-28 09:32:17
gezibao
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 42.4
- 散金: 40
- 帖子: 67
- 在线: 23.4小时
- 虫号: 3659213
- 注册: 2015-01-22
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2016-03-28 16:06:45
4楼2016-03-28 21:03:39
gezibao
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 42.4
- 散金: 40
- 帖子: 67
- 在线: 23.4小时
- 虫号: 3659213
- 注册: 2015-01-22
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2016-03-29 08:39:32
6楼2016-03-29 08:55:40