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wuxchao
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做RNA干扰，构建干扰载体时，目的片段200bp与线性载体连接后转化大肠杆菌无菌落产生，求交流
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2016-03-25 06:45:50
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2016-03-28 21:25:36
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2016-04-04 09:44:19
1、连接不成功，假设双酶切，原因：目的片段没切开；质粒没有切开；T4连接问题
2、转化不成功
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2016-03-26 17:34:57
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2楼
:
Originally posted by
玉兔Jane
at 2016-03-26 17:34:57
1、连接不成功，假设双酶切，原因：目的片段没切开；质粒没有切开；T4连接问题
2、转化不成功
载体切开了，目的片段确定是切开了，T4考虑到了，在准备换着试试
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2016-03-27 09:47:37
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玉兔Jane
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wuxchao
at 2016-03-27 09:47:37
载体切开了，目的片段确定是切开了，T4考虑到了，在准备换着试试
...
看下T4连接酶的说明书，PCR产物和载体的比例在一个范围内效果比较好。
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4楼
2016-03-27 11:18:36
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2016-03-28 22:11:11
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shx0743
at 2016-03-28 21:25:36
最近我也要坐这个，楼主，等你好消息，记得分享下！
好的，没问题
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7楼
2016-03-29 06:21:15
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e生物圈做实验外包做的好
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2016-03-29 12:01:39
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shx0743
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2016-04-04 08:25:37
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张起灵1109
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能不能问下楼主，你的引物是怎么设计的，还有序列是怎么选择的，万分感谢
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10楼
2017-06-20 18:47:40
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