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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » ITS鉴定
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流年如梦

新虫 (正式写手)

[求助] ITS鉴定

真菌ITS鉴定是扩增后直接测序还是挑克隆后测序，有没有具体步骤或方案什么的，急求！！！

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1楼 2016-03-24 22:13:06
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wh-joseph

铁杆木虫 (著名写手)
扩增后取2微左右跑胶，看是否是单一条带，长度是多少，可以用DL2000做marker，若是单一条带，直接送公司测序，如果是试剂盒，一般里面会有测序引物，如果不是单一条带则证明扩增失败

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2楼2016-03-25 00:39:30
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流年如梦

新虫 (正式写手)
如果是单一条带，就把剩余的PCR产物送去测序是吗？那大概要留多少去测序才够用啊

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3楼2016-03-25 07:46:21
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流年如梦

新虫 (正式写手)
如果不是单一条带把目的条带切下纯化后去测序可以吗？

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4楼2016-03-25 07:47:19
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流年如梦

新虫 (正式写手)
RNA含量高会有影响吗？

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5楼2016-03-25 13:27:58
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ly_0510

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 流年如梦 at 2016-03-25 07:46:21
如果是单一条带，就把剩余的PCR产物送去测序是吗？那大概要留多少去测序才够用啊

一般测序公司会有要求的，30ul足够了。
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6楼2016-03-27 20:05:11
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匿名

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7楼2016-03-27 20:11:21
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花与喻橙

新虫 (小有名气)
我现在进行了几个pcr，但我发现这条带不纯，有些是有两条带的，这怎么解决

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8楼2021-07-06 22:30:42
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