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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用乙醇沉淀后进行双酶切，切不出来条带
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 用乙醇沉淀后进行双酶切，切不出来条带 已有3人参与

各位战友，我有个问题想请教一下，用乙醇沉淀后进行双酶切，切不出来条带，请问是为什么呢，用的宝生物的快切酶。相同条件下的不沉淀则可以切成功（乙醇沉淀：加两倍体积的无水乙醇，1/10体积的NaAc，混匀，－20度放15分钟，14000rpm，10分钟离心，弃上清，再加1ml 75％的乙醇，8500rpm，10分钟，控干），能为我指点一下迷津吗？谢谢！
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1楼 2016-03-24 17:21:52
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原海亮

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
酶切后条带什么样子？有载体条带么？

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
3楼2016-03-24 18:47:52
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卡维斯

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该是乙醇残留问题吧
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2楼2016-03-24 18:02:31
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-24 18:47:52
酶切后条带什么样子？有载体条带么？

有条带，但是大小不晓得对不对，因为两个酶切位点也就相隔几十bp，图现在没有了额。没有做单酶切对照

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4楼2016-03-25 14:30:45
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-03-24 18:02:31
应该是乙醇残留问题吧

乙醇会导致切不开么？谢谢

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5楼2016-03-25 14:31:12
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