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18716248350

新虫 (小有名气)

[求助] crispr/cas9敲除后验证 已有2人参与

基因敲除后,验证用荧光筛选后,还要不要做surveyor错切酶法来检测?可不可以直接挑单克隆pcr与野生株比较片段长短,然后再测序?盼各位的回复
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jackie在努力

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
18716248350: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-30 14:27:08
我用CRISPR敲除的是大肠的基因,效率比RED重组要高,我建议是通过菌落PCR+测序验证,方便快捷
16楼2016-03-29 16:05:25
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jackie在努力

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
21楼: Originally posted by 18716248350 at 2016-05-21 18:52:15
你有没有导供体DNA进去,还是通过非同源末端修复的!
...

供体DNA和guide RNA 质粒 共转
23楼2016-09-11 00:18:45
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