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zhushengsheng

木虫 (著名写手)

[交流] 请教一下用LC-MS进行定量是内标如何选择？

大家好，请教一下大家在做LC-MS定量时，这个内标是如何选择的？

一般有哪些常用的内标物呢？

谢谢！
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1楼 2016-03-23 16:14:45
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhushengsheng at 2016-03-28 10:50:22
再请教您一个问题：
大家好，请教一下药代动力学中采血时间点的选择；

如果检测方法的LLOQ是 1ng/mL， 半衰期是3小时； Tmax = 1小时；

采血时间点是： 0, 15min, 30min, 1h, 1.5h, 3h, 4h, 6h, 12h, 18h,  ...

采血时间点要能满足吸收相2-3个点，Cmax附近最少3个点，消除相4-6个点，采血时间持续3-5个半衰期。你这个采血时间点貌似不是特别合理。
计算的时候半衰期一般是采用末端几个点的数据计算，如果采血到12h，就不能直接用你现在的数据取到12h计算，应该需要相应的增加12h之前的采血点吧？
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7楼2016-03-28 12:19:17
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhushengsheng: 金币+10 2016-03-26 16:34:55
最理想的是同位素内标，但这个价格一般比较昂贵，购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适，响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献，看文献中都用的什么内标
有几个据说是做LC/MS用的比较多的内标，地塞米松，拉贝洛尔，阿普唑仑，普萘洛尔，柳氨酚，双氯芬酸。当然我也没有试过，仅供参考哈
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2楼2016-03-23 16:38:15
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王老吉

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhushengsheng: 金币+10 2016-03-26 16:35:02
最好能用同位素的内标，因为在方法学验证时候基质效应，化合物的生物样品就算有基质效应，计算时可以用相对基质效应，但同位素内标比较昂贵，很多试剂公司不一定有货。
一般我们常用的内标应该满足稳定且结构与待测化合物结构相似，色谱行为也能接近的。但是如果找不到合适的，你也可以选择比较常用的如安定（正离子），地塞米松（负离子）。
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3楼2016-03-26 09:23:56
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zhushengsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stingdhk at 2016-03-23 16:38:15
最理想的是同位素内标，但这个价格一般比较昂贵，购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适，响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献，看文献中都用的什 ...

谢谢您，看来问到专家了，再问您两个问题：
1）请问用QQQ- LC-MS-MS定量，是不是两个化合物不用分开也可以定量？没有做过液质联用，看别人啊内标和待测物1，待测物2出峰时间都一样，还是可以定量？说这个用离子对进行定量，看质谱的峰面积？

2）请问一下用试剂盒测定生物样品中的血药浓度，做药代动力学，这个方法要进行方法学验证么？
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4楼2016-03-26 16:44:55
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