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zhushengsheng

木虫 (著名写手)

[交流] 请教一下用LC-MS进行定量是内标如何选择？

大家好，请教一下大家在做LC-MS定量时，这个内标是如何选择的？

一般有哪些常用的内标物呢？

谢谢！
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1楼 2016-03-23 16:14:45
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zhushengsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by stingdhk at 2016-03-27 09:13:42
因为液质主要是根据分子量定性定量的，所以可以不用完全分开的，而且用同位素内标一般情况下是分不开的，但是这种情况下方法学验证的时候需要做一个交叉干扰来证明你的待测物和内标之间不会相互影响
一般药代动力 ...

再请教您一个问题：
大家好，请教一下药代动力学中采血时间点的选择；

如果检测方法的LLOQ是 1ng/mL， 半衰期是3小时； Tmax = 1小时；

采血时间点是： 0, 5min, 15min, 30min, 1h, 2h, 3h, 4h,5h, 6h, 8h, 10h, 12h, 18h, 24h;

进行血药浓度检测的时候，发现 12h 的浓度为 30 ng/mL; 18h 的浓度为 8ng/mL， 24h时浓度为 2ng/mL，这个24小时的浓度还在LLOQ之上；

计算时采血到12小时的时候计算T1/2和;

采血终点设计为18小时的时候计算T1/2;

和采血到24小时的时候计算T1/2这个数据相差是蛮大的；

这种情况我的采血时间终点应该设在哪个点呢？
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6楼2016-03-28 10:50:22
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhushengsheng: 金币+10 2016-03-26 16:34:55
最理想的是同位素内标，但这个价格一般比较昂贵，购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适，响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献，看文献中都用的什么内标
有几个据说是做LC/MS用的比较多的内标，地塞米松，拉贝洛尔，阿普唑仑，普萘洛尔，柳氨酚，双氯芬酸。当然我也没有试过，仅供参考哈
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2楼2016-03-23 16:38:15
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王老吉

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhushengsheng: 金币+10 2016-03-26 16:35:02
最好能用同位素的内标，因为在方法学验证时候基质效应，化合物的生物样品就算有基质效应，计算时可以用相对基质效应，但同位素内标比较昂贵，很多试剂公司不一定有货。
一般我们常用的内标应该满足稳定且结构与待测化合物结构相似，色谱行为也能接近的。但是如果找不到合适的，你也可以选择比较常用的如安定（正离子），地塞米松（负离子）。
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3楼2016-03-26 09:23:56
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zhushengsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stingdhk at 2016-03-23 16:38:15
最理想的是同位素内标，但这个价格一般比较昂贵，购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适，响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献，看文献中都用的什 ...

谢谢您，看来问到专家了，再问您两个问题：
1）请问用QQQ- LC-MS-MS定量，是不是两个化合物不用分开也可以定量？没有做过液质联用，看别人啊内标和待测物1，待测物2出峰时间都一样，还是可以定量？说这个用离子对进行定量，看质谱的峰面积？

2）请问一下用试剂盒测定生物样品中的血药浓度，做药代动力学，这个方法要进行方法学验证么？
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4楼2016-03-26 16:44:55
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