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zhushengsheng

木虫 (著名写手)

[交流] 请教一下用LC-MS进行定量是内标如何选择？

大家好，请教一下大家在做LC-MS定量时，这个内标是如何选择的？

一般有哪些常用的内标物呢？

谢谢！
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1楼 2016-03-23 16:14:45
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yigaozizi at 2016-03-28 14:11:00
跟帖学习中
加入内标物及系列目标物进空白血浆内，按照特定方法进行前处理之后，获得标准曲线，这个曲线需要多久做一次？还是使用QC样品进行校正？怎么校正呢？提前谢谢大家！

方法学验证期间每天两条标曲，实际样品测定期间每个分析批也都需要有随行标准曲线和足够数量的QC
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11楼2016-03-28 15:49:48
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhushengsheng: 金币+10 2016-03-26 16:34:55
最理想的是同位素内标，但这个价格一般比较昂贵，购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适，响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献，看文献中都用的什么内标
有几个据说是做LC/MS用的比较多的内标，地塞米松，拉贝洛尔，阿普唑仑，普萘洛尔，柳氨酚，双氯芬酸。当然我也没有试过，仅供参考哈
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2楼2016-03-23 16:38:15
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王老吉

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhushengsheng: 金币+10 2016-03-26 16:35:02
最好能用同位素的内标，因为在方法学验证时候基质效应，化合物的生物样品就算有基质效应，计算时可以用相对基质效应，但同位素内标比较昂贵，很多试剂公司不一定有货。
一般我们常用的内标应该满足稳定且结构与待测化合物结构相似，色谱行为也能接近的。但是如果找不到合适的，你也可以选择比较常用的如安定（正离子），地塞米松（负离子）。
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3楼2016-03-26 09:23:56
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zhushengsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stingdhk at 2016-03-23 16:38:15
最理想的是同位素内标，但这个价格一般比较昂贵，购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适，响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献，看文献中都用的什 ...

谢谢您，看来问到专家了，再问您两个问题：
1）请问用QQQ- LC-MS-MS定量，是不是两个化合物不用分开也可以定量？没有做过液质联用，看别人啊内标和待测物1，待测物2出峰时间都一样，还是可以定量？说这个用离子对进行定量，看质谱的峰面积？

2）请问一下用试剂盒测定生物样品中的血药浓度，做药代动力学，这个方法要进行方法学验证么？
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4楼2016-03-26 16:44:55
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