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请教一下用LC-MS进行定量是内标如何选择?
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zhushengsheng
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请教一下用LC-MS进行定量是内标如何选择?
大家好,请教一下大家在做LC-MS定量时,这个内标是如何选择的?
一般有哪些常用的内标物呢?
谢谢!
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1楼
2016-03-23 16:14:45
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yigaozizi
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加入内标物及系列目标物进空白血浆内,按照特定方法进行前处理之后,获得标准曲线,这个曲线需要多久做一次?还是使用QC样品进行校正?怎么校正呢?提前谢谢大家!
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8楼
2016-03-28 14:11:00
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stingdhk
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zhushengsheng: 金币+10
2016-03-26 16:34:55
最理想的是同位素内标,但这个价格一般比较昂贵,购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适,响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献,看文献中都用的什么内标
有几个据说是做LC/MS用的比较多的内标,地塞米松,拉贝洛尔,阿普唑仑,普萘洛尔,柳氨酚,双氯芬酸。当然我也没有试过,仅供参考哈
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2楼
2016-03-23 16:38:15
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zhushengsheng: 金币+10
2016-03-26 16:35:02
最好能用同位素的内标,因为在方法学验证时候基质效应,化合物的生物样品就算有基质效应,计算时可以用相对基质效应,但同位素内标比较昂贵,很多试剂公司不一定有货。
一般我们常用的内标应该满足稳定且结构与待测化合物结构相似,色谱行为也能接近的。但是如果找不到合适的,你也可以选择比较常用的如安定(正离子),地塞米松(负离子)。
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3楼
2016-03-26 09:23:56
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zhushengsheng
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2楼
:
Originally posted by
stingdhk
at 2016-03-23 16:38:15
最理想的是同位素内标,但这个价格一般比较昂贵,购买比较麻烦
其次找和你的待测物结构相近的
最次只能是凑一个保留时间合适,响应稳定的
也可以找一下相关文献或者有用你的待测物作内标的文献,看文献中都用的什 ...
谢谢您,看来问到专家了,再问您两个问题:
1)请问用QQQ- LC-MS-MS定量,是不是两个化合物不用分开也可以定量?没有做过液质联用,看别人啊内标和待测物1,待测物2出峰时间都一样,还是可以定量?说这个用离子对进行定量,看质谱的峰面积?
2)请问一下用试剂盒测定生物样品中的血药浓度,做药代动力学,这个方法要进行方法学验证么?
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4楼
2016-03-26 16:44:55
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