24小时热门版块排行榜    

查看: 3361  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

果果gxl2013

金虫 (小有名气)

[交流] 石蜡切片总脱片

各位前辈,我的石蜡切片出现了严重问题,请大家多多指教我的切片展完晾干后先烘烤1.5小时,做之前再烤2.5-3小时,可是一入二甲苯后,虽然没全掉,可是表面就出现渣样突起,通常经过几次洗涤后就掉了有没有前辈能支个招啊
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kop9831

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
果果gxl2013: 金币+3 2016-03-23 16:33:03
引用回帖:
5楼: Originally posted by 果果gxl2013 at 2016-03-23 16:01:41
我用的是纯的二甲苯,两道,各15分钟。现在片子已经烤过了,我只能试试二甲苯梯度了...

梯度脱水的好处就在于,如果你捞片后组织层和玻璃面见有水,就不会一下连着蜡被脱掉
比较擅长做图,尤其是SCI投稿用的,常用工具:PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
7楼2016-03-23 16:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

kop9831

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
果果gxl2013: 金币+1 2016-03-23 15:37:10
你先说说你一般烤片温度多少?我们是60度考15分钟,一般这时候蜡变成半液态,然后再梯度二甲苯脱蜡。
掉片的原因有很多,如玻片是否处理过APES,如果没处理的会很容易掉片。
比较擅长做图,尤其是SCI投稿用的,常用工具:PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
2楼2016-03-23 15:35:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

果果gxl2013

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kop9831 at 2016-03-23 15:35:04
你先说说你一般烤片温度多少?我们是60度考15分钟,一般这时候蜡变成半液态,然后再梯度二甲苯脱蜡。
掉片的原因有很多,如玻片是否处理过APES,如果没处理的会很容易掉片。

我买的多聚赖氨酸包被的片子,60度考的,切完烤1.5小时,做前再烤2小时
3楼2016-03-23 15:38:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kop9831

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
果果gxl2013: 金币+3 2016-03-23 15:59:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by 果果gxl2013 at 2016-03-23 15:38:34
我买的多聚赖氨酸包被的片子,60度考的,切完烤1.5小时,做前再烤2小时...

烤的时间太长了吧,切完如果不是立刻就要做的话,37度烤干,或者晾一晚上就行,烤的时间过长不利于后面修复和组织的粘附。
你后面说的渣样突起就是蜡的凝结物,然后脱蜡过程中一般来说就是泡着静置,因为还没有到封闭那步,所以不能洗涤
一般步骤就是:烤片至蜡融-70%二甲苯-80%二甲苯-90%二甲苯-100%二甲苯-100%二甲苯-无水乙醇-无水乙醇-90%乙醇-80%乙醇-70%乙醇-修复,然后就封闭孵抗体那些了。
比较擅长做图,尤其是SCI投稿用的,常用工具:PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
4楼2016-03-23 15:55:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 13:35 by C3vABopYbZJS
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +4 tianxiaoxian 2026-09-28 7/350 2026-09-30 08:34 by 88817753
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见