应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物设计
343/4返回列表上一页1234下一页
查看: 2062  |  回复: 33
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

gnot_nail

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要克隆CDS？直接在CDS序列两端设计就行，什么发卡结构那些暂且不用管，Tm相差差不多就行，设计两队直接扩看效果。都不行的话，在CDS两端的5UTR和3UTR设计。另外你的基因在你选的模板材料上表达如何也影响你的扩增，这个组织材料不行可以换一个。
赞一下 回复此楼
21楼2016-03-21 23:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

施子墨

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 木小默1212 at 2016-03-21 21:23:11
调整GC含量也想过，但是这样的话引物长度就会过短，影响到了引物的特异性了！...

根据需要调整呗、有时候调一下就不会全红了。不要考虑太多，引物合成也不贵～纠结来纠结去实验耽搁了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
22楼2016-03-22 08:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15729217609

铁虫 (初入文坛)
从两头取，按照引物设计原则自己动手设计。设计好根据你的载体加酶切位点，再加碱基保护。软件设计的不可靠。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
笑一笑没什么事过不了！
23楼2016-03-22 09:26:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木小默1212

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 施子墨 at 2016-03-22 08:40:39
根据需要调整呗、有时候调一下就不会全红了。不要考虑太多，引物合成也不贵～纠结来纠结去实验耽搁了
...

哎，就是考虑的太多才这么纠结，时间还是很紧的！
赞一下 回复此楼
24楼2016-03-22 14:14:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木小默1212

金虫 (初入文坛)
内容已删除
回复此楼
25楼2016-03-22 14:15:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlxmiao

木虫 (著名写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by gnot_nail at 2016-03-21 23:09:27
要克隆CDS？直接在CDS序列两端设计就行，什么发卡结构那些暂且不用管，Tm相差差不多就行，设计两队直接扩看效果。都不行的话，在CDS两端的5UTR和3UTR设计。另外你的基因在你选的模板材料上表达如何也影响你的扩增， ...

http://www.yeastgenome.org/cgi-bin/web-primer
http://primer3plus.com/cgi-bin/dev/primer3plus.cgi
2个很好用的在线引物设计软件

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
26楼2016-03-22 14:50:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木小默1212

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
26楼: Originally posted by mlxmiao at 2016-03-22 14:50:28
http://www.yeastgenome.org/cgi-bin/web-primer
http://primer3plus.com/cgi-bin/dev/primer3plus.cgi
2个很好用的在线引物设计软件
...

谢谢！
回复此楼
27楼2016-03-22 18:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
木小默1212: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-25 09:08:53
用Primer5设计的引物，没有连着8个以上碱基互补的都行。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
28楼2016-03-24 14:30:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木小默1212

金虫 (初入文坛)
好的，谢谢！
回复此楼
29楼2016-03-25 09:08:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王爱沫1

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
30楼2016-03-25 10:17:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 木小默1212 的主题更新
343/4返回列表上一页1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 05:11 by LH5NkK5Ud4bh
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 04:47 by LH5NkK5Ud4bh
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-16 04:27 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-16 04:23 by DgNGHc3h5tPl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:59 by zNcEhTcH7ihq
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:47 by zNcEhTcH7ihq
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:23 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-15 18:11 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:59 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:50 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:39 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:34 by VMDqgnlKimtZ
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:25 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:49 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭