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qibingli金虫 (小有名气)
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[交流]
乳酸菌表达
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本人正在做传染性法氏囊病毒 （IBDV）VP2基因的乳酸菌表达，重组质粒经酶切、PCR鉴定都正确（本人是先连T载体，测序正确后，再从T载体上切下，连接在表达载体上的），所以连接在表达载体上，就没有测序，应该不会有碱基突变或插入和缺失吧。不同的表达条件都试过了，可就是没有搞明白到底是否表达，SDS—PAGE看不出是否表达（本表达系统的表达量很低）、Western-blotting检测没有带（连杂带都没有），请各为好心的虫友帮忙分析一下原因，帮忙想一想办法，推荐一个可行的实验策略，或者给推荐一个基因优化的方法。如果您再这方面很强的话，请留下您的QQ号码好吗，以方便我向您请教，我的QQ号码：425214389。基因序列如下： ATGACGAACCTGCAAGATCAAACCCAACAGATTGTTCCGTTCATACGGAGCCTTCTGATGCCAACAACCGGACCGGCGTCCATTCCGGACGACACCCTAGAGAAGCACACTCTCAGGTCAGAGACCTCGACCTACAATTTGACTGTGGGGGACACAGGGTCAGGGCTAATTGTCTTTTTCCCTGGTTTCCCTGGCTCAATTGTGGGTGCTCACTACACACTGCAGAGCAATGGGAACTACAAGTTCGATCAGATGCTCCTGACTGCCCAGAACCTACCGGCCAGCTACAACTACTGCAGGCTAGTGAGTCGGAGTCTCACAGTGAGGTCAAGCACACTCCCTGGTGGCGTTTATGCACTAAATGGCACCATAAACGCCGTGACCTTCCAAGGAAGCCTGAGTGAACTGACAGATGTTAGCTACAATGGGTTGATGTCTGCAACAGCCAACATCAACGACAAAATCGGGAACGTCCTAGTAGGGGAAGGGGTAACCGTCCTCAGCTTACCCACATCATATGATCTTGGGTATGTGAGACTCGGTGACCCCATTCCCGCTATAGGGCTCGACCCAAAAATGGTAGCAACATGTGACAGCAGTGACAGGCCCAGAGTCTACACCATAACTGCAGCCGATGATTACCAATTCTCATCACAGTACCAAGCAGGTGGGGTAACAATCACACTGTTCTCAGCTAATATCGATGCCATCACAAGCCTCAGCATCGGGGGAGAACTCGTGTTTCAAACAAGCGTCCAAGGCCTTATACTGGGTGCTACCATCTACCTTATAGGCTTTGATGGGACTGCGGTAATCACCAGAGCTGTGGCCGCAGACAATGGGCTAACGGCCGGCACTGACAACCTTATGCCATTCAATATTGCGATTCCAACCAGCGAGATAACCCAGCCAATCACATCCATCAAACTGGAGATAGTGACCTCCAAAAGTGGTGGTCAGGCGGGGGATCAGATGTCATGGTCAGCAAGTGGGAGCCTAGCAGTGACGATCCACGGTGGCAACTATCCAGGGGCCCTCCGTCCCGTCACACTAGTAGCCTACGAAAGAGTGGCAACAGGATCTGTCGTTACGGTCGCCGGGGTGAGCAACTTCGAGCTGATCCCAAATCCTGAACTAGCAAAGAACCTGGTCACAGAATACGGCCGATTTGACCCAGGAGCTATGAACTACACAAAATTGATACTGAGTGAGAGGGACCGTCTTGGCATCAAGACCGTATGGCCAACAAGAGAGTACACTGACTTTCGCGAGTACTTCATGGAGGTGGCCGACCTCAACTCTCCCCTCAAGATTGCAGGAGCATTTGGCTTCAAAGACATAGTCCGGGCCCTAAGGAGGATAGCT |
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