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yilishanshan木虫 (正式写手)
大星星
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[求助]
HPLC测定兽药（恩诺沙星），色谱柱变短了，怎么不出峰呢？ 已有1人参与
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做兽药（恩诺沙星）残留量检测，高效液相色谱-荧光检测，国标方法是用色谱柱C18 4.6×250mm，5μm，流动相：乙腈-水=18:82，流速0.8mL/min 恩诺沙星的保留时间在16min左右。 实验室没有长柱子，我用的是C18 4.6×100mm，3.5μm。流动相：乙腈-水=20:80，流速1mL/min。进了一针恩诺沙星对照品，3min左右出个峰，峰型也不太好，感觉和溶剂峰差不多。不确定是不是恩诺沙星，但之后跑了1个小时都没东西出来。 之后又进个对照，条件改成乙腈-水=10:90，想着峰会不会延后，在10min左右出峰。但竟然跑了好久，也没东西出来。 请问大家是怎么回事呢？色谱柱太短了，做不出吗? 相同比例的流动相，色谱柱变短，粒径也变小了，同一物质的保留时间是缩短还是延迟？ 下面是国标方法做出的图：  无标题.jpg |
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