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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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蓝冰1778

[交流] 关于细胞污染问题

最近养的293细胞,发现老有些虫子似的东西在动,在普通的倒置显微镜的高倍镜就能看到!
以前碰到的污染都是会使培养基变浑浊,颜色变黄,可这种污染少的时候好像并不妨碍细胞的生长,培养基也不会变浑,颜色不变黄,反而有些变得更碱了(有些偏紫),问师兄说不是污染,可明明看到它在一动一动的,直到它长的太多影响细胞生长了,才明显表现出污染的特征!
开始也怀疑是支原体污染,可是正常情况下支原体是不能看到的呀!
各位师兄 师姐,有知道怎末回事的吗?指导一下啊!
万分感谢!!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

黑胶虫吧
其实主要是操作的问题,一不小心就会污染
养成良好的操作习惯即可
另外,建议培养基丢了吧,重新配重新滤,用太久难免飘入一些乱七八糟的
2楼2008-10-18 00:00:07
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蓝冰1778

黑胶虫可以在普通倒置显微镜的高倍下看到吗?有位同事说以前污染过黑胶虫,可是在普通镜下是看不到的!
我又重新配了,可是有同事用了一下我的培养基换液,我看了一下还是有那种东西,不过他好像不影响细胞的生长,他的细胞好好的!
3楼2008-10-18 23:37:00
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米见方ggsddu

金虫 (小有名气)

only屋里哇啦

似乎是黑胶虫,可以在400倍显微镜下看到小黑点在动,小黑点有时呈点状,有时呈小的片状,运动形式为在原地振动(类似布朗运动)
在细胞状态良好时,二者竞争小;若状态不好,则很快繁殖。
与血清质量有很大关系
低调潜行
4楼2008-10-19 00:54:54
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052983

新虫 (初入文坛)

问题我们也碰到过,有时候细胞能长起来,有时候就不行了,最好还是扔了吧,一次细胞铺多点,注意分批处理细胞,
God helps those who help themselves.
5楼2008-10-19 22:38:36
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蓝冰1778

嗯,非常感谢大家!!
6楼2008-10-19 23:01:38
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smallcat227

木虫 (著名写手)

http://baike.baidu.com/view/1457791.htm

目前对“黑胶虫”的定论:有2种解释:
  第一, 黑胶虫为生物。它是小于细菌的生物,直径小于0.1μm,大多国外血清中多见,可能是国外牛血清中含有的某种原虫。只要它是生物,那么在培养基中一定会对细胞有影响。
  第二, 黑胶虫不是生物。国内的血清中,通常灭活之后都会有絮状沉淀出现,而黑胶虫出现时,所使用的血清被反复冻融过多次。所以推测,所谓的“黑胶虫”其实就是血清中的某些蛋白成分的物质,经过灭活之后丧失活性,在培养基中,镜检见到的运动其实是这些物质在溶液中做“布朗运动”。随着细胞消耗培养基,这些物质越来越多,最后细胞所用的营养消耗完,细胞容易死亡。

对于“黑胶虫”的处理方法:
  首先,血清买回来灭活前冻融应逐级冻融,即按照-20℃——4℃完全融化后,再置入水浴中,与室温一起升高到56度,这样的目的是避免温度骤变,导致血清中的营养物质丧失活性。
  第二,血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装,尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无菌。
  第三,细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%,但如果血清冻融次数过多,那营养物质丧失活性,按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分,故培养基配置时一般用18%-20%的血清。
7楼2008-10-20 08:42:32
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