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关于细胞污染问题
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最近养的293细胞，发现老有些虫子似的东西在动，在普通的倒置显微镜的高倍镜就能看到！ 以前碰到的污染都是会使培养基变浑浊，颜色变黄，可这种污染少的时候好像并不妨碍细胞的生长，培养基也不会变浑，颜色不变黄，反而有些变得更碱了（有些偏紫），问师兄说不是污染，可明明看到它在一动一动的，直到它长的太多影响细胞生长了，才明显表现出污染的特征！ 开始也怀疑是支原体污染，可是正常情况下支原体是不能看到的呀！ 各位师兄 师姐，有知道怎末回事的吗？指导一下啊！ 万分感谢！！ |
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http://baike.baidu.com/view/1457791.htm 目前对“黑胶虫”的定论：有2种解释： 第一， 黑胶虫为生物。它是小于细菌的生物，直径小于0.1μm，大多国外血清中多见，可能是国外牛血清中含有的某种原虫。只要它是生物，那么在培养基中一定会对细胞有影响。 第二， 黑胶虫不是生物。国内的血清中，通常灭活之后都会有絮状沉淀出现，而黑胶虫出现时，所使用的血清被反复冻融过多次。所以推测，所谓的“黑胶虫”其实就是血清中的某些蛋白成分的物质，经过灭活之后丧失活性，在培养基中，镜检见到的运动其实是这些物质在溶液中做“布朗运动”。随着细胞消耗培养基，这些物质越来越多，最后细胞所用的营养消耗完，细胞容易死亡。 对于“黑胶虫”的处理方法： 首先，血清买回来灭活前冻融应逐级冻融，即按照-20℃——4℃完全融化后，再置入水浴中，与室温一起升高到56度，这样的目的是避免温度骤变，导致血清中的营养物质丧失活性。 第二，血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装，尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无菌。 第三，细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%，但如果血清冻融次数过多，那营养物质丧失活性，按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分，故培养基配置时一般用18%-20%的血清。 |
7楼2008-10-20 08:42:32
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