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liuwukang

新虫 (小有名气)

[求助] 诱导时可否降低温度增加时间? 已有2人参与

目前使用bl21 codon plus菌株,该菌株要使用氯霉素和卡那霉素两种抗生素,第一次诱导没有经验,细菌转接后长的比一般的菌慢,由于时间不够所以在od0.5不到就加了诱导剂,western结果显示蛋白是包涵体,但是可能是诱导剂加的早了导致菌量不够,但是菌实在长的慢,又没法大半夜的做实验,想过夜诱导,所以过夜诱导是不是应该适当降低温度?IPTG的浓度要不要适当增加?目前IPTG用的是0.1mM

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liuwukang

新虫 (小有名气)

2楼2016-03-18 08:34:40
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刘氏响声丸

铁虫 (小有名气)

同样遇到包涵体问题了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2016-03-19 11:35:52
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌体生长慢,我们一般不加抗,然后可以加大转接量,我们一般也是诱导过夜,从二十到三十七度都用过,主要是看不同的蛋白了,祝好!

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
4楼2016-03-19 12:28:40
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单车男孩一号

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

种子接种量增加,可以缩短生长时间
5楼2016-03-23 14:19:49
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