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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 诱导时可否降低温度增加时间？
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liuwukang

新虫 (小有名气)

[求助] 诱导时可否降低温度增加时间？ 已有2人参与

目前使用bl21 codon plus菌株，该菌株要使用氯霉素和卡那霉素两种抗生素，第一次诱导没有经验，细菌转接后长的比一般的菌慢，由于时间不够所以在od0.5不到就加了诱导剂，western结果显示蛋白是包涵体，但是可能是诱导剂加的早了导致菌量不够，但是菌实在长的慢，又没法大半夜的做实验，想过夜诱导，所以过夜诱导是不是应该适当降低温度？IPTG的浓度要不要适当增加？目前IPTG用的是0.1mM

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1楼 2016-03-17 23:52:34
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liuwukang

新虫 (小有名气)
顶一下

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2楼2016-03-18 08:34:40
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刘氏响声丸

铁虫 (小有名气)
同样遇到包涵体问题了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2016-03-19 11:35:52
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌体生长慢，我们一般不加抗，然后可以加大转接量，我们一般也是诱导过夜，从二十到三十七度都用过，主要是看不同的蛋白了，祝好！

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
4楼2016-03-19 12:28:40
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单车男孩一号

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

种子接种量增加，可以缩短生长时间
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5楼2016-03-23 14:19:49
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