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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教用于诱变的紫外灯
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shnzh

金虫 (正式写手)

[交流] 请教用于诱变的紫外灯

用于诱变育种的紫外灯是什么样子的，都说要距离30cm搅拌，具体怎么操作的，紫外灯可以直接用超净台里的紫外灯么？还是有专门用于这种操作的紫外灯？
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1楼 2008-10-17 15:56:28
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ch3ch2oh

铜虫 (初入文坛)
虽然以前用过，但也不知道紫外灯与超净台的紫外灯有何差异，只是一大一小，估计也只是型号功率上有所差别吧。有个专门的紫外诱变箱，类似于一个密闭的小型超净台，里面就一个紫外灯管，一个搅拌器，使用前紫外照射半小时，用的时候将菌液放入，打开搅拌，开紫外计时就是了，很简单的
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2楼2008-10-17 16:33:22
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蓝风叙

木虫 (著名写手)

以前做诱变时在网上找的一点东西

：一、用试管架将或者什么东西都可以，调整到合适的诱变距离。二、用布将无菌操作台四周围上。三、将菌液调整到合适的浓度，取出一定量倒入培养皿中，直接诱变。四、将培养皿打开，用紫外灯照射一定时间后，诱变完成。五、倒入培养基，振荡均匀。六、同时做一个没有经过诱变的对照样。七、将五和六同时放入培养箱中培养。

诱变距离也没有特别要求，当灯的功率一定时，紫外诱变只有两个变量：诱变距离和诱变时间。判定诱变时间都是通过致死率。所以完全可以固定一个距离（只要定下来就行，无所谓多少），只确定一个时间就行。

将稀释好的菌悬液放到距紫光灯20-30cm的磁力搅拌器上，作的时候把灯关掉，拉好窗帘，找一个几瓦的红灯只要能看见操作就行。做完以后把平板包好，再套个黑袋子就行。主要是为了防止光修复

诱变之前，先开紫外灯预热20min；以使紫外光波稳定；
2、诱变操作时最好在红光下进行，以使诱变效果好；
3、孢悬液转入6cm或9cm直径的平皿内时，不可太多，3～6ml即可，多则诱变时会溅出孢悬液，使诱变的孢悬液浓度发生变化，且诱变过程中菌体接收紫外照射剂量存在不同；

赞成用超净台改装成诱变箱,诱变一般注意几个点:照射时间,照射距离,菌体浓度,可以用致死率和正突变率做为衡量指标,特别注意光复活对诱变菌体的影响,诱变后应蔽光!
事实上如果以追求产物量为目的,致死率是没必要看的,只要在诱变时定好时间,距离,保留正突变继续诱变即可!!

把磁力搅拌器放在诱变箱的外部，这样方便调节转速，而且便于搬动，很多实验室不会有专用的搅拌器用做诱变的。当然要是有的话，固定好转速和位置，这样就方便多了。要是放在外边的话诱变箱的底部不要用铁皮和不锈钢的，那样的话磁力搅拌器没法对菌液进行搅拌了，磁力搅拌器只能放里面才能用。

买个红色的灯泡操作时用就可以了.紫外线穿透能力很弱.诱变照射时没有磁力搅拌器会导致效果差,如果实在没有的话,可以在照射过程中用戴手套的手隔一段时间摇动一次,我想会好一些.另外,紫外灯的功率以15W为宜.
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认真做人踏实做事静心做研究
3楼2008-10-17 16:47:22
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shnzh

金虫 (正式写手)
非常感谢！
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4楼2008-10-21 09:59:59
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shnzh

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ch3ch2oh at 2008-10-17 16:33:
虽然以前用过，但也不知道紫外灯与超净台的紫外灯有何差异，只是一大一小，估计也只是型号功率上有所差别吧。有个专门的紫外诱变箱，类似于一个密闭的小型超净台，里面就一个紫外灯管，一个搅拌器，使用前紫外照射 ...

你说的专门的紫外诱变箱哪里有卖的啊？我在网上都没有查到。
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5楼2008-10-21 10:11:22
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碧荷叶

铜虫 (初入文坛)
诱变用的紫外灯波长是257.3nm，15W。诱变箱我觉得可以定做，只要避光就行，箱顶装上紫外灯管，有一个可以抽拉的门就行了。还要准备一个磁力搅拌器，平板放上后距紫外灯大概30cm。
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6楼2008-10-21 12:45:45
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