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shnzh

金虫 (正式写手)

[交流] 请教用于诱变的紫外灯

用于诱变育种的紫外灯是什么样子的,都说要距离30cm搅拌,具体怎么操作的,紫外灯可以直接用超净台里的紫外灯么?还是有专门用于这种操作的紫外灯?
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ch3ch2oh

铜虫 (初入文坛)

虽然以前用过,但也不知道紫外灯与超净台的紫外灯有何差异,只是一大一小,估计也只是型号功率上有所差别吧。有个专门的紫外诱变箱,类似于一个密闭的小型超净台,里面就一个紫外灯管,一个搅拌器,使用前紫外照射半小时,用的时候将菌液放入,打开搅拌,开紫外计时就是了,很简单的
2楼2008-10-17 16:33:22
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蓝风叙

木虫 (著名写手)

以前做诱变时在网上找的一点东西

:一、用试管架将或者什么东西都可以,调整到合适的诱变距离。二、用布将无菌操作台四周围上。三、将菌液调整到合适的浓度,取出一定量倒入培养皿中,直接诱变。四、将培养皿打开,用紫外灯照射一定时间后,诱变完成。五、倒入培养基,振荡均匀。六、同时做一个没有经过诱变的对照样。七、将五和六同时放入培养箱中培养。

诱变距离也没有特别要求,当灯的功率一定时,紫外诱变只有两个变量:诱变距离和诱变时间。判定诱变时间都是通过致死率。所以完全可以固定一个距离(只要定下来就行,无所谓多少),只确定一个时间就行。

将稀释好的菌悬液放到距紫光灯20-30cm的磁力搅拌器上,作的时候把灯关掉,拉好窗帘,找一个几瓦的红灯只要能看见操作就行。做完以后把平板包好,再套个黑袋子就行。主要是为了防止光修复

诱变之前,先开紫外灯预热20min;以使紫外光波稳定;
2、诱变操作时最好在红光下进行,以使诱变效果好;
3、孢悬液转入6cm或9cm直径的平皿内时,不可太多,3~6ml即可,多则诱变时会溅出孢悬液,使诱变的孢悬液浓度发生变化,且诱变过程中菌体接收紫外照射剂量存在不同;

赞成用超净台改装成诱变箱,诱变一般注意几个点:照射时间,照射距离,菌体浓度,可以用致死率和正突变率做为衡量指标,特别注意光复活对诱变菌体的影响,诱变后应蔽光!
事实上如果以追求产物量为目的,致死率是没必要看的,只要在诱变时定好时间,距离,保留正突变继续诱变即可!!

把磁力搅拌器放在诱变箱的外部,这样方便调节转速,而且便于搬动,很多实验室不会有专用的搅拌器用做诱变的。当然要是有的话,固定好转速和位置,这样就方便多了。要是放在外边的话诱变箱的底部不要用铁皮和不锈钢的,那样的话磁力搅拌器没法对菌液进行搅拌了,磁力搅拌器只能放里面才能用。

买个红色的灯泡操作时用就可以了.紫外线穿透能力很弱.诱变照射时没有磁力搅拌器会导致效果差,如果实在没有的话,可以在照射过程中用戴手套的手隔一段时间摇动一次,我想会好一些.另外,紫外灯的功率以15W为宜.
认真做人踏实做事静心做研究
3楼2008-10-17 16:47:22
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shnzh

金虫 (正式写手)

非常感谢!
4楼2008-10-21 09:59:59
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shnzh

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by ch3ch2oh at 2008-10-17 16:33:
虽然以前用过,但也不知道紫外灯与超净台的紫外灯有何差异,只是一大一小,估计也只是型号功率上有所差别吧。有个专门的紫外诱变箱,类似于一个密闭的小型超净台,里面就一个紫外灯管,一个搅拌器,使用前紫外照射 ...

你说的专门的紫外诱变箱哪里有卖的啊?我在网上都没有查到。
5楼2008-10-21 10:11:22
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碧荷叶

铜虫 (初入文坛)

诱变用的紫外灯波长是257.3nm,15W。诱变箱我觉得可以定做,只要避光就行,箱顶装上紫外灯管,有一个可以抽拉的门就行了。还要准备一个磁力搅拌器,平板放上后距紫外灯大概30cm。
6楼2008-10-21 12:45:45
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