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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 求助，急，跪谢！
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我是胡子

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，急，跪谢！ 已有3人参与

我准备在大肠杆菌中异源表达并纯化Methanosarcina acetivorans中的acetate kinase （基因locus number为MA3606），请问：
1）该基因稀有密码子含量如何？我该使用什么蛋白表达菌株？
2）选择一种pET载体，使该异源表达的蛋白带上C末端的His tag。
3）设计一个纯化方法，将该蛋白纯化（注明用什么buffer，什么色谱柱，什么流速，柱与柱之间需要进行什么处理，如何检测蛋白等）。
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1楼 2016-03-16 23:45:25
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

问题太多了，太宽泛。his  taq融合蛋白都用镍螯合高流速琼脂糖凝胶纯化。具体买填料会有说明书。祝顺利。
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5楼2016-05-13 15:57:17
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