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关于GC-MS内标法测脂肪酸含量的问题求助。 已有1人参与
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求各位大神帮帮忙。  我这边现在的情况是这样的，我是要测鱼油脂肪酸含量，我们的鱼油是乙酯型的。37脂肪酸混合标准品是甲酯型的。我们用的是c19做内标。但是在购买内标的时候，由于供货原因，我们只买了甲酯型的C19内标。然后去分析计算含量。 我们先是把甲酯型的C19按一定浓度加入到37种脂肪酸混标里，用GC-MS去分析，然后利用峰面积和浓度去计算响应因子Fi。 因为没有和鱼油样品形式一样的乙酯型内标，我们直接用甲酯型C19内标按一定量加入到鱼油中然后一起甲酯化，用的是三氟化硼处理法。（不知道这样是不是不可行，必须要用乙酯型的内标才行？） 然后GC-MS去分析，利用峰面积，带入公式去计算。（还有就是我们的鱼油样品中本身也含有微量的C19，所以我们先把鱼油样品按相同条件进行甲酯化，计算峰面积，然后进行减除） 可是计算出的值非常不准确，和检测公司出的报告差距非常大。 就想向请教一下，我们这个实验过程中的问题有那些？ 另外就是计算精密度和回收率，看过一些参考文献，但没有具体说明这个是怎么计算出来的。文献中说是向已知脂肪酸浓度的样品中加入不同水平的脂肪酸混标溶液，经过相同方法处理。那我是否可以将检测公司测出的报告作为我的已知浓度？然后把混标稀释成不同水平加如入后计算呢？那我这里的精密度和回收率是怎么计算出来的呢？ 希望大神们能指点指点，我是才接触气相不久，缺乏经验。 |
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