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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 离子交换柱的清洗
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Lykken

新虫 (正式写手)

[求助] 离子交换柱的清洗 已有4人参与

实验室之前用DEAE Sephadex A-25纯化了多糖，已经按照说明书的步骤将离子交换柱处理过了，可是柱子上还是有色素洗不掉，求解决办法！PS：再生依次用的溶液是2mol/L氢氧化钠（1个床体积）、0.1mol/L氢氧化钠（1个床体积）、30%异丙醇
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1楼 2016-03-16 08:44:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

YR-王

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多糖除色素的方法有活性炭脱色，过氧化氢氧化脱色，阴离子交换纤维素脱色。第一种多糖损失大，第二种氧化剂可能改变多糖结构，第三种回收率较高，不影响样品结构。所以你这个就相当于用你的固定相即脱色，又分离啦。我用完之后也有大量的吸附，我都是碱酸碱交替再生，每次都水洗至中性，可是色素也并不能完全除去，颜色会稍稍浅一点。不过我觉得你的碱浓度偏高啊，这样会损坏固定相的，因为你的填料固定相的基质是葡聚糖，所以会有很多糖苷键，强碱会容易把这些破坏掉的。你自己注意点吧~
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5楼2016-03-17 10:11:45
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普通回帖

大思想小世界

木虫 (知名作家)
那爪子好难看啊。
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懂的多，有分量
2楼2016-03-16 09:08:30
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Lykken

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 大思想小世界 at 2016-03-16 09:08:30
那爪子好难看啊。

重点不是爪子、


好吧、我该换个角度的

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3楼2016-03-16 14:18:39
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大思想小世界

木虫 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Lykken at 2016-03-16 14:18:39
重点不是爪子、
好吧、我该换个角度的
...

4楼2016-03-17 09:27:48
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苍雪95811

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by YR-王 at 2016-03-17 10:11:45
多糖除色素的方法有活性炭脱色，过氧化氢氧化脱色，阴离子交换纤维素脱色。第一种多糖损失大，第二种氧化剂可能改变多糖结构，第三种回收率较高，不影响样品结构。所以你这个就相当于用你的固定相即脱色，又分离啦。 ...

请问，你用的是什么酸洗的，我现在也遇到类似问题，求指点············
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6楼2016-04-22 20:41:38
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

看你的柱子，有些吸附剂太脏了，最好扔了，或者用于一些简单分离（初分离）的样品。离子交换用于纯化多糖，还是比较少见的，能介绍有什么新意吗？
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7楼2016-04-23 12:27:10
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Lykken

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-04-23 12:27:10
看你的柱子，有些吸附剂太脏了，最好扔了，或者用于一些简单分离（初分离）的样品。离子交换用于纯化多糖，还是比较少见的，能介绍有什么新意吗？

那应该用什么柱子纯化？

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8楼2016-04-25 09:13:34
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柳絮虫

新虫 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Lykken at 2016-04-25 09:13:34
那应该用什么柱子纯化？
...

若量大些，可以用简单的水溶醇沉的方法；若量少，可用LH-20，G-100等凝胶，看你的样品颜色，似乎是很粗的样品，应该有些前处理再行分离。当然，土豪除外
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9楼2016-04-25 11:40:16
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Lykken

新虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-04-25 11:40:16
若量大些，可以用简单的水溶醇沉的方法；若量少，可用LH-20，G-100等凝胶，看你的样品颜色，似乎是很粗的样品，应该有些前处理再行分离。当然，土豪除外...

需要量巨大、而且成品要纯

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10楼2016-04-26 08:09:17
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