应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物测序后发现有片段丢失
52/1返回列表
查看: 1984  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

喵喵小猫鱼

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物测序后发现有片段丢失 已有5人参与

我做PCR，将回收的产物连接载体测序后发现：我的目的片段（~150bp）两端引物部分的序列都是对的，但是引物之间的部分基本都丢失了，只剩下十几个bp，想知道是什么原因，请大家指教。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-03-15 20:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科大第二人

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌落PCR假阳性很正常，还是以测序为准
赞一下 回复此楼
哈哈
12楼2016-03-18 18:48:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物之间只剩几十bp？你确定是你的目的片段丢失，而不是根本就没有连上目的片段么？建议你分析一下引物之间那几十bp，看看是不是多克隆位点。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
天空才是极限，我有信心飞的更高！
2楼2016-03-15 20:07:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

喵喵小猫鱼

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-15 20:07:50
引物之间只剩几十bp？你确定是你的目的片段丢失，而不是根本就没有连上目的片段么？建议你分析一下引物之间那几十bp，看看是不是多克隆位点。

并没有多克隆位点，而且我从模板上克隆目的片段后的电泳结果条带挺好的，不知道为什么，测序出来就没有了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-15 20:29:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-15 20:07:50
引物之间只剩几十bp？你确定是你的目的片段丢失，而不是根本就没有连上目的片段么？建议你分析一下引物之间那几十bp，看看是不是多克隆位点。

从模板上克隆挺好的，是什么意思？指你的PCR获得的目的产物么？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
天空才是极限，我有信心飞的更高！
4楼2016-03-15 20:35:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 中科院材料273求调剂 +3 yzydy 2026-03-15 3/150 2026-03-15 21:15 by ms629
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 0703化学求调剂 +5 很老实人 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:57 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 328，0703考生求调剂，一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 327求调剂 +4 Ffff03 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:17 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 293求调剂 +3 世界首富 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:27 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 26考研求调剂 +5 丶宏Sir 2026-03-13 5/250 2026-03-13 13:05 by JourneyLucky
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考博] 读博申请 +5 感dd 2026-03-10 7/350 2026-03-11 17:02 by QGZDSYS
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[基金申请] 提交后的基金本子，已让学校撤回了，可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
[考研] 一志愿山东大学，总分327，英语二79，有论文，有竞赛，已过四六级 +3 木木目目1 2026-03-09 3/150 2026-03-09 19:52 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭