【答案】应助回帖

天空才是极限，我有信心飞的更高！

11楼2016-03-16 19:10:23

晃晃飞天

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11楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-16 19:10:23
换个人估计都要嫌弃我啰嗦了
...

是真的好详细，好热心！32个赞

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12楼2016-03-16 20:24:45

仇峰12306

铁虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by 小李纸11 at 2016-03-16 18:04:30
载体上的酶切位点我知道，目的基因上的也知道，但是两者之间没有相同的呀，，，该怎么办？...

i你目的基因的那个质粒图谱有吗？看看那上边有你想要的酶切位点吗？
最简单的方法就是你p出来具有载体上酶切位点的目的片段这样，然后连接

13楼2016-03-17 08:35:45

顶你个球

金虫 (小有名气)

钻研，耐心，

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学习，学习

14楼2016-04-06 11:01:36

cp0713

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7楼: Originally posted by 小李纸11 at 2016-03-16 18:04:30
载体上的酶切位点我知道，目的基因上的也知道，但是两者之间没有相同的呀，，，该怎么办？...

你直接看酵母空载有哪些限制酶酶切位点（目的基因不能含有该酶切位点），选两个离的较远的，然后开始设计带酶切位点的引物，pcr把目的片段从重组质粒p出来，然后双酶切酵母空载和pcr回收产物，连接，转化到大肠，假阳性鉴定，提质粒酶切鉴定，测序～完成了！

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15楼2016-05-04 00:01:09

蓉蓉aa

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学习学习了，感谢

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16楼2018-03-13 18:48:01

蓉蓉aa

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送红花一朵

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6楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-15 21:03:45
在草稿纸上自己画画，其实是可以琢磨清楚的。像这样将目的基因从一个载体转换到另一个载体上，也称为亚克隆，常用的方法就是酶切和pcr，而有合适酶的话，酶切常常是首选。酶切做亚克隆，你需要掌握实验中两个主角的 ...

学习了，感谢感谢

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17楼2018-03-13 18:48:44