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小李纸11银虫 (正式写手)
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[求助]
求助，现在需要自己构建重组质粒，怎样选择合适的限制性内切酶呢。。。 已有3人参与
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| 我已经把含有目的基因的质粒从大肠杆菌里提出来了，现在需要把它从该质粒上切下来，然后连接到毕赤酵母的空质粒上，请问我该如何选择合适的酶进行切割呢？需要考虑的因素有哪些呢？还有。。。是用双酶切还是单酶切比较合适呢？谢谢啦。。。 |
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【答案】应助回帖
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小李纸11: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2016-03-17 14:13:07
小李纸11: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2016-03-17 14:13:07
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没有合适的酶切位点，就需要通过pcr方法将目的基因从载体上扩增下来，这时候就只用考虑酵母载体的酶切位点就行，选择好之后，就在设计引物时把选好的酶切位点加到引物的5’端，然后加保护碱基就OK 发自小木虫Android客户端 |
9楼2016-03-16 18:24:21
2楼2016-03-15 11:28:45
小李纸11
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- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
3楼2016-03-15 11:55:55
4楼2016-03-15 13:24:33
