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cgjlove

专家顾问 (著名写手)

[求助] 多糖分子量测定求助 已有2人参与

实验室用液相,TSK G4000PWXL 的柱子及RID检测器测多糖分子量,用葡聚糖标品作为标品,分别用超纯水和0.1M的NaCl作为流动相测出来的多糖分子量差了几十倍,水作为流动相测出来大概为800 kD而NaCl作为流动相测只有40 kD,想问下为什么两种流动相测得结果差这么多?哪种流动相测得结果比较靠谱?
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

出峰时间分别是多少,哪个更快
2楼2016-03-14 10:50:24
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cgjlove: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-14 17:34:18
sytucom: 金币+5, 回帖精彩,谢谢参与 2016-03-27 20:02:25
这个和你的标品有关吧,标准品有很多种,选择文献推荐的,或者有报道的
标品也是分别做了纯水和盐水么?如果没做,那推荐你分别测试一下。然后又各自的校正曲线。
如果你分别做了标品校正,查了你这个柱子,有效分子量:1,000-700,000 
来源:http://wenku.baidu.com/link?url= ... YLs2Yi0gnkXgBSWjuFC
3楼2016-03-14 12:11:58
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cgjlove

专家顾问 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zinfly at 2016-03-14 12:11:58
这个和你的标品有关吧,标准品有很多种,选择文献推荐的,或者有报道的
标品也是分别做了纯水和盐水么?如果没做,那推荐你分别测试一下。然后又各自的校正曲线。
如果你分别做了标品校正,查了你这个柱子,有效分 ...

跑了标品,两种流动相都跑了所以才得出不同流动相分子量差别太大的结果。这个说明我也看了找不出来分子量差这么多的原因
4楼2016-03-14 12:31:08
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cgjlove: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-03-14 17:34:28
sytucom: 金币+5, 回帖精彩,谢谢参与 2016-03-27 20:02:16
TSK G4000是微弱负电的。如果样品带有负电荷,比如酸性多糖,流动相是水的话,那么就存在斥力,那多糖应该是比较快出来的,如果流动相是氯化钠,多了氯离子,这样情况就比较复杂了,我觉得应该会更慢出来。
就拿葡聚糖标品来说,它自身是没有电荷的,在以水做流动相时,它是不受影响的,比较快出来。氯化钠做流动相时,就存在离子间的作用力了,就会较慢出来。

所以问你出峰时间,可以比较一下看看是不是这种情况,我也是猜测。所以具体用什么流动相得看柱子性质,更重要的是样品性质。
5楼2016-03-14 15:42:42
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