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依琪看海

新虫 (小有名气)


[交流] 酶切

质粒4000多bp,片段4000如何双酶切看目的片段连上了吗?

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Esther_zhang

新虫 (初入文坛)



依琪看海(金币+1): 谢谢参与
用你目的片段2端的酶切位点双酶切啊,一电泳,能看到目的片段大小的条带,不就连接上了。
2楼2016-03-11 13:31:59
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依琪看海

新虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by Esther_zhang at 2016-03-11 13:31:59
用你目的片段2端的酶切位点双酶切啊,一电泳,能看到目的片段大小的条带,不就连接上了。

切了,但质粒大小和片段一样,怎么区分?

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4楼2016-03-11 14:17:29
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)



依琪看海(金币+1): 谢谢参与
单酶切,或用载体和目的基因上别的酶切位点射

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5楼2016-03-11 16:59:57
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卡维斯

金虫 (正式写手)



依琪看海(金币+1): 谢谢参与
双酶切,找一个载体上没有但是片段里面有的和两端一起切。
单酶切应该也可以,注意去磷酸化。
或者用载体和片段里的引物P一个看看。
6楼2016-03-11 17:14:13
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aoluoquan

银虫 (正式写手)



依琪看海(金币+1): 谢谢参与
那就用非单克隆位点做单酶切更好

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7楼2016-03-11 18:14:29
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syhorchid3楼
2016-03-11 13:44   回复  
依琪看海(金币+1): 谢谢参与
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