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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切
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依琪看海

新虫 (小有名气)

[交流] 酶切

质粒4000多bp,片段4000如何双酶切看目的片段连上了吗？

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1楼 2016-03-11 13:20:08
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Esther_zhang

新虫 (初入文坛)
★
依琪看海(金币+1): 谢谢参与
用你目的片段2端的酶切位点双酶切啊，一电泳，能看到目的片段大小的条带，不就连接上了。
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2楼2016-03-11 13:31:59
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依琪看海

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Esther_zhang at 2016-03-11 13:31:59
用你目的片段2端的酶切位点双酶切啊，一电泳，能看到目的片段大小的条带，不就连接上了。

切了，但质粒大小和片段一样，怎么区分？

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4楼2016-03-11 14:17:29
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)
★
依琪看海(金币+1): 谢谢参与
单酶切，或用载体和目的基因上别的酶切位点射

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5楼2016-03-11 16:59:57
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卡维斯

金虫 (正式写手)
★
依琪看海(金币+1): 谢谢参与
双酶切，找一个载体上没有但是片段里面有的和两端一起切。
单酶切应该也可以，注意去磷酸化。
或者用载体和片段里的引物P一个看看。
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6楼2016-03-11 17:14:13
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aoluoquan

银虫 (正式写手)
★
依琪看海(金币+1): 谢谢参与
那就用非单克隆位点做单酶切更好

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7楼2016-03-11 18:14:29
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syhorchid3楼
2016-03-11 13:44   回复  
依琪看海(金币+1): 谢谢参与
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