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geyafei321

新虫 (正式写手)

[求助] 同一管菌液提取的两管质粒,酶切结果大不相同,为什么?已有1人参与

大家好,最近遇到一个很头疼的问题,构建载体时,摇好的菌抽提质粒后,第一次酶切正常,由于质粒用完,后再重新用同一管菌抽提质粒,发现酶切切不开,怎么回事啊
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
切不开是什么概念,酶切完跑出来几条带?如果是一条带,那条带大小是载体,还是载体加片段?还是双酶切都没有作用,跑出来就是质粒的条带?

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-03-10 19:11:50
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geyafei321

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-10 19:11:50
切不开是什么概念,酶切完跑出来几条带?如果是一条带,那条带大小是载体,还是载体加片段?还是双酶切都没有作用,跑出来就是质粒的条带?

一种情况是单酶切以后跑胶,条带会比没有切过的载体跑的快!
另一种情况就是50微升体系3微升的酶切过夜,都无法全部切开。
3楼2016-03-11 18:46:46
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