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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 同一管菌液提取的两管质粒，酶切结果大不相同，为什么？
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geyafei321

新虫 (正式写手)

[求助] 同一管菌液提取的两管质粒，酶切结果大不相同，为什么？ 已有1人参与

大家好，最近遇到一个很头疼的问题，构建载体时，摇好的菌抽提质粒后，第一次酶切正常，由于质粒用完，后再重新用同一管菌抽提质粒，发现酶切切不开，怎么回事啊
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1楼 2016-03-10 17:56:34
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
切不开是什么概念，酶切完跑出来几条带？如果是一条带，那条带大小是载体，还是载体加片段？还是双酶切都没有作用，跑出来就是质粒的条带？

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
2楼2016-03-10 19:11:50
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geyafei321

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-10 19:11:50
切不开是什么概念，酶切完跑出来几条带？如果是一条带，那条带大小是载体，还是载体加片段？还是双酶切都没有作用，跑出来就是质粒的条带？

一种情况是单酶切以后跑胶，条带会比没有切过的载体跑的快！
另一种情况就是50微升体系3微升的酶切过夜，都无法全部切开。
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3楼2016-03-11 18:46:46
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