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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助关于elisa蛋白结合原理
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donny那

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于elisa蛋白结合原理 已有1人参与

本人想建立elisa方法检测sIgA,采用间接法，，具体步骤是：抗sIgA的一抗+sIgA+抗SIgA的酶标记二抗。。。。做了好久都没有结果，
1.我这种方法中sIgA能同时和一抗、二抗结合吗？
2.是不是和一抗结合之后没有和二抗结合的位点了？
3.那么结合的原理是什么呢？要如何改进呢？


各位大神帮帮忙呀。坐等。。
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1楼 2016-03-09 10:27:35
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donny那

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xuanrufeng at 2016-03-10 08:42:12
你的底物呢？二抗应该是抗一抗的酶标二抗  你现在抗S IgA的酶表二抗也在只能算作一抗吧  不会和一抗结合的  具体应该是底物 S IgA 一抗 酶标二抗

老师您好，我感觉我现在做的算是间接法测抗体，，我的想法是包被抗siga的一抗，和siga结合，然后加抗siga的酶标记二抗。。我是新手，不知道您说的那个底物是TMB吗？如果是TMB我现在是在酶后面加的底物显色液啊。。。
如果你说的底物也是抗体的一样的话，那加你说的那个底物的作用是什么呢？我给我讲讲原理吗，谢谢了。这方面确实不懂。。。期待你的回复
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5楼2016-03-10 11:18:25
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xuanrufeng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的底物呢？二抗应该是抗一抗的酶标二抗  你现在抗S IgA的酶表二抗也在只能算作一抗吧  不会和一抗结合的  具体应该是底物 S IgA 一抗 酶标二抗
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本性难移
4楼2016-03-10 08:42:12
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