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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 酚氯仿抽提质粒，加入苯酚离心后上层是苯酚，求教怎么回事？
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cbsbigbang

新虫 (初入文坛)

[求助] 酚氯仿抽提质粒，加入苯酚离心后上层是苯酚，求教怎么回事？ 已有1人参与

目前正在手提质粒，抽提方法是加入苯酚后离心，取上层水相，然后加入24:1的氯仿和异戊醇，再取上层水相后加异戊醇，离心。目前我加入苯酚后离心，上层液体与苯酚颜色一样，吸出后加入氯仿混合液没有明显分层，因此无法继续，求解这是什么原理？
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1楼 2016-03-07 16:24:42
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nannanz2012

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加入苯酚后貌似要涡旋15s
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2楼2016-03-07 16:58:45
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cbsbigbang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nannanz2012 at 2016-03-07 16:58:45
加入苯酚后貌似要涡旋15s

我是颠倒混匀的，就是不知道为什么离心后上层还是苯酚
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3楼2016-03-07 17:55:37
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反应链

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cbsbigbang at 2016-03-07 17:55:37
我是颠倒混匀的，就是不知道为什么离心后上层还是苯酚...

酚氯仿溶液用TE饱和，你是不是吸取到上层水溶液了啊？你可以直接用氯仿异戊醇代替，看看是否出现同样问题吧。

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4楼2016-03-07 21:59:25
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jackyoung

新虫 (正式写手)
明显吸的是上层，这个就不解释了吧。

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CestLaVie
5楼2016-03-07 23:55:36
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cbsbigbang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 反应链 at 2016-03-07 21:59:25
酚氯仿溶液用TE饱和，你是不是吸取到上层水溶液了啊？你可以直接用氯仿异戊醇代替，看看是否出现同样问题吧。
...

感谢您的回复，但是我有几点没看懂：
我用的phenol saturated吸取的是下层
您提到的酚氯仿溶液是指酚：氯仿：异戊醇25:24:1的混合液吗？TE饱和是怎么回事？
另外，氯仿异戊醇是代替什么东西的？
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6楼2016-03-08 22:58:45
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反应链

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cbsbigbang at 2016-03-08 22:58:45
感谢您的回复，但是我有几点没看懂：
我用的phenol saturated吸取的是下层
您提到的酚氯仿溶液是指酚：氯仿：异戊醇25:24:1的混合液吗？TE饱和是怎么回事？
另外，氯仿异戊醇是代替什么东西的？...

建议里加SolutionIII后，直接用24:1氯仿异戊醇抽提，不使用酚氯仿。

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7楼2016-03-08 23:37:45
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