| 查看: 6429 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
上官abc金虫 (正式写手)
王下七武海
|
[交流]
菌液PCR有条带，质粒双酶切只有一条带，是怎么回事？急！
|
||
|
RACE PCR后经过一系列步骤，到菌液PCR时有目的条带，但很浅。 然后大量摇菌并提取质粒进行双酶切，发现只有一条带，貌似这条带就是载体PMD18-T。上一次没进行双酶切就送质粒去测序，结果测序公司发回报告说送去的是空载体。这次看来也是没连上，实在不知道为何老是连不上PMD18-T，请各位大侠指点迷津，谢谢！ 我用的是宝生物的RACE和PMD18-T试剂盒，菌液PCR目的片段470bp左右，3'RACE得到的目的片段在2000bp左右。  双酶切电泳图  菌液PCR电泳图 |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有271人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
上官abc
金虫 (正式写手)
王下七武海
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1012.2
- 散金: 2
- 帖子: 332
- 在线: 105.1小时
- 虫号: 2433438
- 注册: 2013-04-24
- 性别: GG
- 专业: 植物学
9楼2016-03-07 17:36:52
2楼2016-03-04 21:28:56
yvonne9044
新虫 (正式写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 1894.6
- 红花: 11
- 帖子: 566
- 在线: 95.8小时
- 虫号: 2302493
- 注册: 2013-02-26
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2016-03-05 00:47:59
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
应该是假阳性，PCR体系或所用菌液中有污染，毕竟T载连这么大的片段那个效率是很低的。另外，3'RACE别没事就搞那么大片段，这有点儿扯了。这种体系中亲测还是500-1000比较靠谱，要不那个成功率太低。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-03-05 09:02:20
30