应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请教大神，有关质粒提取及转染、表达
71/1返回列表
查看: 1074  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 请教大神，有关质粒提取及转染、表达 已有1人参与

要把大肠杆菌里面存储的已经构建好的质粒提取出来，然后导入另一种大肠杆菌或者毕赤酵母里进行表达，老师说不能提PT7开头的，那我该提什么呢？PESC?又或者PET？这些都表示什么呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-03-03 10:08:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-03-07 10:23:39
PT7和pET应该都是T7启动子启动基因表达的，该启动子只能被T7 RNA聚合酶识别，因此如果做表达，应该选择DE3溶源宿主如BL21（DE3）、Rosseta(DE3)等等。
老师的意思是不是让你注意一下合适的启动子啊~
赞一下 回复此楼
2楼2016-03-03 19:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李纸11

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-03-03 19:06:41
PT7和pET应该都是T7启动子启动基因表达的，该启动子只能被T7 RNA聚合酶识别，因此如果做表达，应该选择DE3溶源宿主如BL21（DE3）、Rosseta(DE3)等等。
老师的意思是不是让你注意一下合适的启动子啊~

所以PT7开头的提取质粒了也不能表达对么？可是现在手里只有PT7，PESC-HIS开头的啊，，，别人说PET开头的提取质粒可以表达对么？我都不懂，这些编码都表示什么啊。。。急死了。。。
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-06 20:42:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李纸11

银虫 (正式写手)
这两个是都不行吗？那我该怎么办？要自己构建合适的质粒吗？
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-06 20:44:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifechuteng

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小李纸11 at 2016-03-06 20:42:35
所以PT7开头的提取质粒了也不能表达对么？可是现在手里只有PT7，PESC-HIS开头的啊，，，别人说PET开头的提取质粒可以表达对么？我都不懂，这些编码都表示什么啊。。。急死了。。。...

质粒是都可以提取的，但是表达的话一定要看质粒上的启动子会不会被宿主表达，你一定要问一下老师，您的表达宿主是什么？
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-07 09:18:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李纸11

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-03-07 09:18:36
质粒是都可以提取的，但是表达的话一定要看质粒上的启动子会不会被宿主表达，你一定要问一下老师，您的表达宿主是什么？...

要在大肠杆菌里面表达，有TB1，BL21，Rosetta等等。。。
赞一下 回复此楼
6楼2016-03-07 11:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifechuteng

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小李纸11 at 2016-03-07 11:43:53
要在大肠杆菌里面表达，有TB1，BL21，Rosetta等等。。。...

要看看是不是(DE3)，也就是T7RNA聚合酶整合到基因组的，如果是，那就可以用的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-03-07 16:41:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小李纸11 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:14 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 12:13 by l0VvVHGBGRLv
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 11:32 by l0VvVHGBGRLv
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:19 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:07 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:39 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭