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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 请教大神，有关质粒提取及转染、表达 已有1人参与

要把大肠杆菌里面存储的已经构建好的质粒提取出来，然后导入另一种大肠杆菌或者毕赤酵母里进行表达，老师说不能提PT7开头的，那我该提什么呢？PESC?又或者PET？这些都表示什么呢？
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1楼 2016-03-03 10:08:00
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-03-07 10:23:39
PT7和pET应该都是T7启动子启动基因表达的，该启动子只能被T7 RNA聚合酶识别，因此如果做表达，应该选择DE3溶源宿主如BL21（DE3）、Rosseta(DE3)等等。
老师的意思是不是让你注意一下合适的启动子啊~
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2楼2016-03-03 19:06:41
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小李纸11

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-03-03 19:06:41
PT7和pET应该都是T7启动子启动基因表达的，该启动子只能被T7 RNA聚合酶识别，因此如果做表达，应该选择DE3溶源宿主如BL21（DE3）、Rosseta(DE3)等等。
老师的意思是不是让你注意一下合适的启动子啊~

所以PT7开头的提取质粒了也不能表达对么？可是现在手里只有PT7，PESC-HIS开头的啊，，，别人说PET开头的提取质粒可以表达对么？我都不懂，这些编码都表示什么啊。。。急死了。。。
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3楼2016-03-06 20:42:35
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小李纸11

银虫 (正式写手)
这两个是都不行吗？那我该怎么办？要自己构建合适的质粒吗？
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4楼2016-03-06 20:44:18
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小李纸11 at 2016-03-06 20:42:35
所以PT7开头的提取质粒了也不能表达对么？可是现在手里只有PT7，PESC-HIS开头的啊，，，别人说PET开头的提取质粒可以表达对么？我都不懂，这些编码都表示什么啊。。。急死了。。。...

质粒是都可以提取的，但是表达的话一定要看质粒上的启动子会不会被宿主表达，你一定要问一下老师，您的表达宿主是什么？
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5楼2016-03-07 09:18:36
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小李纸11

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-03-07 09:18:36
质粒是都可以提取的，但是表达的话一定要看质粒上的启动子会不会被宿主表达，你一定要问一下老师，您的表达宿主是什么？...

要在大肠杆菌里面表达，有TB1，BL21，Rosetta等等。。。
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6楼2016-03-07 11:43:53
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小李纸11 at 2016-03-07 11:43:53
要在大肠杆菌里面表达，有TB1，BL21，Rosetta等等。。。...

要看看是不是(DE3)，也就是T7RNA聚合酶整合到基因组的，如果是，那就可以用的

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7楼2016-03-07 16:41:30
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