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tangzonghao

金虫 (正式写手)

[求助] 求教,为什么蛋白印迹跑到下面的蛋白都没有条带呢 已有1人参与

最近在做一个15kd的蛋白,但是总是做不出来,用丽春红染色过后发现25kd以上都呈条带状,而25kd以下都没有条带,跟曝光过的结果对比起来一样,就是呈一团的样子,有没有谁遇到过此类问题呢?怎样解决呢?求教我
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kop9831

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by tangzonghao at 2016-03-03 18:01:13
不会的,marker还在,胶不对的话marker应该也是散的

marker就算跑过了也还会看见的,那是染料留存在膜上
比较擅长做图,尤其是SCI投稿用的,常用工具:PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
6楼2016-03-04 07:56:39
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kop9831

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tangzonghao: 金币+2, 有帮助, 不是转过去了,我用丽春红和考马斯亮蓝染色都没有发现下面有条带,曝光后下面条带呈一团,没有分开,到下面都散开了 2016-03-03 14:23:37
15k的小分子蛋白不能用太高的电流转膜,不然会直接转过去,你这种情况就是这样,你可以试试降低转膜时间或者减小电流,小分子最好用NC膜转
比较擅长做图,尤其是SCI投稿用的,常用工具:PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
2楼2016-03-03 12:02:58
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tangzonghao

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kop9831 at 2016-03-03 12:02:58
15k的小分子蛋白不能用太高的电流转膜,不然会直接转过去,你这种情况就是这样,你可以试试降低转膜时间或者减小电流,小分子最好用NC膜转

不过marker没有问题,估计是样品的问题吧,哎不清楚
3楼2016-03-03 14:25:37
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doubeibei123

新虫 (初入文坛)

会不会是配胶的浓度不对,或者条带跑出去了
4楼2016-03-03 17:15:29
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