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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求教，为什么蛋白印迹跑到下面的蛋白都没有条带呢
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tangzonghao

金虫 (正式写手)

[求助] 求教，为什么蛋白印迹跑到下面的蛋白都没有条带呢 已有1人参与

最近在做一个15kd的蛋白，但是总是做不出来，用丽春红染色过后发现25kd以上都呈条带状，而25kd以下都没有条带，跟曝光过的结果对比起来一样，就是呈一团的样子，有没有谁遇到过此类问题呢？怎样解决呢？求教我
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1楼 2016-03-02 15:35:14
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kop9831

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tangzonghao: 金币+2, ★有帮助, 不是转过去了，我用丽春红和考马斯亮蓝染色都没有发现下面有条带，曝光后下面条带呈一团，没有分开，到下面都散开了 2016-03-03 14:23:37
15k的小分子蛋白不能用太高的电流转膜，不然会直接转过去，你这种情况就是这样，你可以试试降低转膜时间或者减小电流，小分子最好用NC膜转
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比较擅长做图，尤其是SCI投稿用的，常用工具：PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
2楼2016-03-03 12:02:58
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tangzonghao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kop9831 at 2016-03-03 12:02:58
15k的小分子蛋白不能用太高的电流转膜，不然会直接转过去，你这种情况就是这样，你可以试试降低转膜时间或者减小电流，小分子最好用NC膜转

不过marker没有问题，估计是样品的问题吧，哎不清楚
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3楼2016-03-03 14:25:37
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doubeibei123

新虫 (初入文坛)
会不会是配胶的浓度不对，或者条带跑出去了
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4楼2016-03-03 17:15:29
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tangzonghao

金虫 (正式写手)
不会的，marker还在，胶不对的话marker应该也是散的

发自小木虫IOS客户端
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5楼2016-03-03 18:01:13
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kop9831

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by tangzonghao at 2016-03-03 18:01:13
不会的，marker还在，胶不对的话marker应该也是散的

marker就算跑过了也还会看见的，那是染料留存在膜上
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比较擅长做图，尤其是SCI投稿用的，常用工具：PS、AI、Image-Pro、GraphpadPrism
6楼2016-03-04 07:56:39
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