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蓬山远音

金虫 (小有名气)

[求助] 感受态细胞见鬼了 已有4人参与

今天提质粒菌液离心富集,离心过后出现奇怪的现象。菌富集在Ep管底部,上清在上部,但是在管底部竟然出现胶状透明物,不知道是什么鬼。昨天做转化离心时也出现这样的状态。求大神解答,实在郁闷!感受态细胞为Top10

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huajunwux

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
“转化离心时也出现这样的状态”
这么早就可以看到了,会不会是你所用感受态细胞的冻存液?
虽然一般情况下大家都用甘油,不会看到这种现象。不确定你所用的这个是不是别的冻存液。

感觉这个应该没有影响,你都摇菌成功率了,只要能转化成功就行。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-03-02 07:07:16
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-字仲康

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

3楼2016-03-02 18:15:25
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蓬山远音

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by huajunwux at 2016-03-02 07:07:16
“转化离心时也出现这样的状态”
这么早就可以看到了,会不会是你所用感受态细胞的冻存液?
虽然一般情况下大家都用甘油,不会看到这种现象。不确定你所用的这个是不是别的冻存液。

感觉这个应该没有影响,你都 ...

用的是甘油,今天用提的质粒做了pcr验证,没什么问题。就是不知道这种现象怎么回事。

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4楼2016-03-02 22:30:17
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蓬山远音

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by -字仲康 at 2016-03-02 18:15:25
或者,看看降低离心的转速咯

转速3000每分,一直都用这个转速,以前没出现过这种情况。

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5楼2016-03-02 22:31:25
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古月问你哦

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你在富集菌体前溶液中有没有加入甘油之类的保护剂,如果加入甘油没有混匀也可能出现胶质化物
我就是我,是不一样的烟火
6楼2016-03-10 13:16:08
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蓬山远音

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 古月问你哦 at 2016-03-10 13:16:08
你在富集菌体前溶液中有没有加入甘油之类的保护剂,如果加入甘油没有混匀也可能出现胶质化物

没有,然后就直接提质粒了,之后不放心又用pcr验证,没有问题。

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7楼2016-03-10 14:35:19
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wang2568

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

菌体自溶现象啊,菌种活力衰退,毒性质粒或污染菌可能导致菌体溶解。提取质粒能提出出来不就可以了,管他状态如何。

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8楼2016-03-10 16:32:53
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