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小鞭炮521

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 鉴定发酵液中的抗菌活性物质是什么成分?多糖、蛋白质或是肽类?用什么方法? 已有1人参与

发酵液具有抑菌活性,为提纯活性物质,需要鉴定出活性物质的成分,其具体方法有哪些?
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songkaide

木虫 (正式写手)

2楼2016-03-01 19:06:19
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


多糖就加糖甘酶看水解的如何?蛋白就加蛋白酶

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-01 19:35:33
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小鞭炮521

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by songkaide at 2016-03-01 19:06:19
帮顶

谢谢
4楼2016-03-02 14:22:43
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小鞭炮521

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by biosci at 2016-03-01 19:35:33
多糖就加糖甘酶看水解的如何?蛋白就加蛋白酶

请问有没有方法可以进行提纯?
5楼2016-03-02 14:23:32
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贺玉广

新虫 (正式写手)

6楼2016-03-02 15:48:58
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lfxz2001

新虫 (初入文坛)

Hplc分离纯化加质谱分析

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-03-03 02:34:50
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joshuablack

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小鞭炮521: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢,尝试一下 2016-03-03 13:44:24
1、加大上样量,跑一下薄层,喷抑菌菌种,喷培养基,保证湿度培养,染色,观察抑菌物质在哪个位置;
2、再跑一板抠出来相应的斑点,萃取,
3、量多的话(10mg以上)做元素组成,根据结果基本就知道是蛋白还是多糖了
4-1、扫一下全波长,看看多少nm有吸收
4-2、用C18柱分别换两种检测器走(VWD检测器、示差检测器),是糖的话示差检测器对比vwd会有明显吸收,记录色谱条件,
4-3、有条件了可以跑下ms看看分子量(但不推荐,因为虽然大家都说跑质谱,但是如果你不知道是啥东西,就不知道用神马色谱条件,就不知道用什么最适合分析的色谱柱:是蛋白柱啦,凝胶柱啦,C18柱啦,苯基柱啦,更不知道怎么带电荷跑合适,碎片也无从分析,也就是,这时候走质谱是没什么用的)
再往后就是测序了,就是委托出去做的事情了
8楼2016-03-03 09:36:42
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