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毕赤酵母表达酶 已有2人参与
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各位大神好，最近老板让我在毕赤酵母中表达一种原核细菌来源的酶，非得让我在酵母中表达，我提议在大肠中表达不同意，真的是要晕死！现在有一些问题想请教大神们： 1.原核来源的蛋白在酵母中表达是不是一定需要做密码子优化？ 2.做了密码子优化会不会对这种酶的性质产生影响？不做优化的酶可以在酵母中成功表达吗？ 谢谢大家了！ 发自小木虫IOS客户端 |
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781055707
木虫 (著名写手)
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感谢参与，应助指数 +1
肉肉肉.: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 多谢大神 2016-03-01 14:37:40
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，1.原核来源的蛋白在酵母中表达是不是一定需要做密码子优化？这个问题看情况，你先下载毕赤酵母的稀有密码子表，你的酶里不是有太多毕赤酵母稀有密码子的话就不用优化。 2.做了密码子优化会不会对这种酶的性质产生影响？不做优化的酶可以在酵母中成功表达吗？ 酶的性质不会变。酶序列连进去过，不一定能成功表达。 毕赤酵母是真核表达了，你用原核细菌来源的酶去真核表达，会让酶在折叠上比原核的更精度些。但酶的活性就不一定了，你要电转的话，最好叫个师哥师姐带下，新手往往会失败很多次的。 |
14楼2016-02-29 16:51:27
2楼2016-02-28 01:02:39
原海亮
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西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2016-02-29 22:50:54
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2016-02-29 22:50:54
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密码子优化主要就是针对这样的跨界表达的，原核和真核密码子偏好性还是有区别的，所以进行密码子优化是有必要的。另外，进行密码子优化的目的就是在保证氨基酸序列不变的情况下，将原有的密码子换成酵母里常用的，对于翻译出来的最终蛋白是没有影响的，就像搬运一件物品一样，这个地方喜欢用马车，而在另一个地方人家喜欢用卡车，而且那里根本找不到马车，所以你只有换成人家的喜欢的工具，但最终的目的都一致，就是把对应的氨基酸运过来！ 发自小木虫Android客户端 |
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肉肉肉.3楼2016-02-28 10:39:42
4楼2016-02-28 14:23:11