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prthefu

木虫 (著名写手)

[交流] 关于固体LB 培养基的颜色问题 已有50人参与

我在配制固体LB培养基的时候,遇到了一些问题,请高手帮忙解答,谢谢··········
Q:
1.按照配方配制LB培养基的时候,都溶解好了之后,说是要调ph在7.0-7.4之间,这是为什么啊,ph值有什么作用呢
2. 配固体LB时,最后各瓶分装好之后,依次加Agar,灭菌后,发现颜色不对,这是为什么呢,下图前两个是我配出来的,最后一个是师姐们得到的。
颜色不对,问题出在哪呢,我配了几次,都是棕色,颜色比较深。是灭菌后温度降到八九十就拿出来还是等降到四五十度拿出来啊。

关于固体LB 培养基的颜色问题
P60307-101451.jpg


关于固体LB 培养基的颜色问题-1
P60307-101511.jpg


关于固体LB 培养基的颜色问题-2
P60307-101549.jpg
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junqing

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一个培养基而已,又不影响做实验

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7楼2016-03-07 12:48:33
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刘烈奥

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
美拉德反应,碳源和氮源分开灭就没有颜色了。灭菌后ph会下降个0.5左右,刚好酸性。适合细菌生长。

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我的脚步,你住当不了!
2楼2016-03-07 10:44:41
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我是行者无疆

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
灭菌到70度左右(如果还需要再加抗生素什么的,可以这个时候加),然后就可以倒平板了。

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4楼2016-03-07 11:28:07
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
碳氮源配制时也没有分开,是不是跟你灭菌时间长短还有温度有关系,通常我们灭菌都是120度保温20min,压力一下来基本就拿出来在烘箱(70度左右)烘半个小时左右拿到无菌室倒平板跟下面的图一样的,颜色是没那么深的。PH值调到7.0-7.2之间不要调太高了。再或者是灭菌时培养基中是否进水,如果进水颜色也会深的。楼主再试试吧。祝福!
希望大家多多交流。
5楼2016-03-07 11:57:33
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prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2016-03-07 11:57:33
碳氮源配制时也没有分开,是不是跟你灭菌时间长短还有温度有关系,通常我们灭菌都是120度保温20min,压力一下来基本就拿出来在烘箱(70度左右)烘半个小时左右拿到无菌室倒平板跟下面的图一样的,颜色是没那 ...

我正常配置,灭菌时有一次是降到40多度拿出来的,就是那种棕色的,有老师说,那种颜色,说明里面的营养成分有些许破坏,所以不太好。
还有一次,我也是降到差不多七八十拿出来的,然后,不知道为什么,颜色也是棕色····
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6楼2016-03-07 12:24:14
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Cathering_w

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
就是灭菌后及时从灭菌锅中取出,不然颜色一定会变深,其他问题影响不大,即使营养物质破坏了些也没太大关系,普通微生物很坚强的,如果水质稳定,不调pH也是可以的,实验做多了,有些小问题可忽略,要知道做这个实验干嘛用,不必太纠结

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博士终于毕业了,未来还有什么困难能难得倒我呢!加油我得未来。
17楼2016-03-07 20:22:11
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prthefu

木虫 (著名写手)

应该不是光线的问题吧,反正就是颜色差的很多

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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26楼2016-03-07 23:08:29
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prettydog

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
LB正确的颜色就是浅黄色,棕色肯定不对。

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56楼2016-03-09 20:57:48
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普通回帖

prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 刘烈奥 at 2016-03-07 10:44:41
美拉德反应,碳源和氮源分开灭就没有颜色了。灭菌后ph会下降个0.5左右,刚好酸性。适合细菌生长。

碳源和氮源怎么分开灭啊,
师姐她们也都是全部混一起配的,颜色就是那种淡黄色的
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3楼2016-03-07 11:05:11
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卧慈傲

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你确定配方没放错!或者说你使用的实验原料是不是过期?
而且平常配培养基基本上不需要调ph值的!还有你的灭菌时间是不是不对!
而且我觉得完全没必要溶解好再高压灭菌,直接高压灭菌就可以包括溶解这一步了!

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8楼2016-03-07 12:52:02
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skull123

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
颜色而已,不会影响它的,灭的时间应该是一样,但是在灭菌锅里降温拿出来的时间有差异而已,但是不会影响细菌生长,但是如果是计数的话培养基灭菌批次不一样可能会影响菌的终溶度,计数最好用同一批次灭菌的培养基。

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9楼2016-03-07 13:25:48
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2012chen

新虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有影响吗 这算是问题吗

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为学之道,存乎一心!
10楼2016-03-07 13:27:31
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