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分类 共搜索到 46 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 酵母筛库
将携带目的基因的pGBKT7诱饵质粒单转酵母细胞,培养两天后,平板长糊一片,求助一下是什么原因造成的?
《锦麟》 2024-08-30 01:08
微生物 PGBKT7
PGBKT7转化AH109一直失败,长不出来想做酵母单杂验证的,你们有什么简单的转化方法吗
Tr1st 2022-06-09 09:30
分子生物 求助pGBKT7-53和pGADT7-T 载体详细序列
求助酵母双杂交阳性对照载体pGBKT7-53和pGADT7-T载体详细序列
li8338628 2021-01-16 10:38
分子生物 酵母双杂交四缺板上阳性生长且变蓝,阴性对照也长不变蓝
AH109感受态、pGADT7-T、pGBKT7-53和pGBKT7-lam做酵母双杂交的两个对照。在四缺板上阳性对照正常,lam阴性对照没有出现蓝色但是好像也长酵母了。第一张图阳性,第二张图阴性。
沐沐沐沐沐淼 2020-12-13 05:09
资源求助 求酵母单杂载体pAbai和阳性对照,以及pGBKT7-GAL4
可以用双杂载体和bifc载体交换,诚求
sheepm 2020-07-01 10:19
生物科学 质粒pcr鉴定问题
麻烦各位前辈帮忙看看原始质粒:pgbkt7-gene,测序以及pcr鉴定都没问题扩繁质粒:通过原始质粒大肠杆菌转化扩繁而得,问题:扩繁质粒测序成功,但是pcr后跑胶总是鉴定不出来,引物与原始...
DAYESHIDAI 2019-09-19 01:13
分子生物 求助酵母双杂pGADT7-T和pGBKT7-Lam载体
求助酵母双杂pGADT7-T和pGBKT7-Lam载体,谢谢大家~biostar2009youlinglyw
niu007 2019-04-11 01:38
分子生物 酵母双杂筛库中3AT的使用
实验室用的文库的连接pGADT7,转入到Y187的然后我们的目标基因转入的pGBKT7,转入到Y2Hgold中试验种发现该基因存在自激活,其中在200ng/ul的AbA上也生长。那么,SampleText我看了一些说明,3...
蒋左左右右 2018-12-18 01:39
转基因 酵母双杂交技术在筛选抗趋化因子受体4的单链抗体的研究
结果发现:(1)构建的诱饵质粒pGBKT7-CXCR4没有自激活作用。(2)采用CXCR4作为抗原筛选单链抗体文库,利用酵母双杂交技术最终筛选得到3个阳性单链抗体克隆,经过DNA序列分析确定为3个人的单链...
medicilon 2018-12-11 01:12
转基因 细胞株蛋白的作用及相互作用蛋白筛选研究
实验结果表明,pGBKT7-Cygb酵母诱饵表达载体构建成功,可以用于文库筛眩(2)以pGBKT7-Cygb重组质粒为诱饵从Mate&PlateTMLibrary-UniversalHuman(Normalized)文库中筛选CYGB的相互作用蛋白...
medicilon 2018-12-04 08:59
硕博家园 请问一下谁有pGBKT7载体和AH109菌株?求赠,也可买?谢谢
请问一下谁有pGBKT7载体和AH109菌株?求赠,也可买?谢谢
sr980101 2018-07-26 07:38
微生物 酵母自激活
pGBKT7-53是融合了鼠p53激活域和GAD-BD的蛋白,那么酵母pGBKT7-53是否有自激活效应?而在双杂中又用它作为了阳性对照,如果有自激活,怎么作为阳性对照啊?哪位大神出来解释一下,小弟很急...
ljy525380 2018-05-30 07:01
生物科学 酵母转化总不长
我最近在做酵母双杂,单转PGADT7到缺亮氨酸培养基总也不长,而转化的PGBKT7长得也很少,是按照试剂盒给的做的感受态细胞,不知道这个和质粒浓度有没有关系呢?
曲奇Wendy 2018-05-18 03:34
硕博家园 求助pGBKT7质粒
各位科研大神,有没有谁有pGBKT7质粒呀,可不可以友情馈赠一些呢?
凌儿凌夷 2018-04-24 07:28
硕博家园 酵母双杂不同载体的疑问
各位,有没有哪位大神用过酵母的PDEST32,与PDEST-GAD424载体,本人现在有PDEST-GAD424的酵母菌,请问能用PGBKT7的来做酵母双杂吗?谢谢给位啦!
zss007 2018-03-29 01:16
分子生物 酵母双杂检测蛋白互作,三缺能长,四缺不长
最近在做酵母双杂交,Clontech的AH109、pGADT7、pGBKT7系统,检测两个蛋白是否互作,二缺上长得很好,也验证了确实转化成功,三缺也长得好好的,四缺上就不长了,不知何故,望哪位高手帮...
taoxiang180 2017-08-14 03:41
生物科学 酵母双杂要验证2个已知蛋白互作要怎么做?
求具体点的过程呀。实验室没有买试剂盒。但是老师从外面带回来了PGADT7和PGBKT7载体,我已经把2个基因分别连上了2个载体。
panyax 2017-05-09 03:32
硕博家园 酵母AH109双转
我用的酵母AH109菌株进行双转,涂SD-TL双缺板,长菌了,没污染,用PCR检测基因转没转进去,为什么跑胶跑不出来啊?...我用的是PGBKT7和PGADT7这两个载体,江湖救急,谢谢谢谢!
ys159357258 2017-04-13 01:08
微生物 酵母AH109双杂交
我用的酵母AH109菌株进行双转,涂SD-TL双缺板,长菌了,没污染,用PCR检测基因转没转进去,为什么跑胶跑不出来啊?...我用的是PGBKT7和PGADT7这两个载体,江湖救急,谢谢谢谢!
ys159357258 2017-04-13 12:16
分子生物 酵母双杂交
最近构建了一个诱饵载体(pGBKT7),在做自激活实验时,一缺+x-a-gal的平板上变蓝了,但是在二缺上不长(对照正常),这种情况如何解释啊?还能用来筛库吗?
暗星 2017-04-01 06:41
农林 遇到很棘手的问题,请酵母双杂交的高手赐教!
让Takara公司给建了个Y2H文库,用的是Clontech的体系,实验室很多人用不同的bait筛库,结果做验证时发现几乎90%的prey都能与空的pGBKT7在三缺、四缺、四缺+3AT,四缺+x-a-gal的板上长。...
karen_zm 2017-03-17 01:54
微生物 关于病毒基因图谱和数据库比对
楼主这里还有一些载体图谱例如OE(S1300),永久GFP(S1300-GFP),瞬时GFP,28a,1381,1391,AD,BD(pGBKT7),N-N1,C-C1。如果有需要图谱可以的话可以留邮箱~质粒的话现在没有了,都在学校里...
空境弥音 2016-09-02 08:16
分子生物 载体转进感受态细胞,与文库进行mating实验,转到培养基上半小时...
我将带有目的基因的PGBKT7载体转染进AH109感受态细胞,与含有丹参cDNA的文库Y187进行mating实验,在三缺培养基上长出来了,转到含有x_gal的四缺培养基上,半小时后全部变蓝了。这是什么情况...
1327624500 2016-03-21 05:01
分子生物 载体构建
我通过高保真酶扩的两个4000+bp的序列,但是怎么都连接不到PGBKT7,或者Pcambia1301的载体上,麻烦有经验的各位给点建议,我用的是takara的T4连接酶,16度16小时或者24小时4度过夜或者3天都...
liling0601 2015-11-30 03:03
硕博家园 老师让抓紧把根瘤菌的iii 型效应因子先克隆到载体 pgbkt7中
做好酵母双杂。我是新人。具体怎么开始啊。操作步骤啊?求帮忙[发自小木虫ios客户端]
zyj9423 2015-11-16 08:33
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