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最后发表
生物科学
【经验分享】CRISPR基因敲除细胞系构建全流程踩坑指南——从递送...
以下是主流递送方式的系统对比:2.1质粒DNA递送适用细胞:
HEK293
T、HCT116等易转染细胞优势:成本低廉,技术成熟度高操作简便,无需特殊设备可通过抗生素筛选实现稳定表达劣势:质粒需进入...
微界创生
2026-02-06 02:22
生物科学
基因敲除细胞系怎么做?快速构建稳定敲除细胞系全流程解析
细胞系选择是基础细胞系本身的生物学特性是影响编辑成功率的重要基矗若实验未对细胞系作出明确限定,可优先考虑常用模式细胞,如
HEK293
T、HCT116等,这类细胞生长稳定、转染效率较高,能够...
我太秀了
2026-02-05 08:39
生物科学
原代细胞 vs 细胞系的区别
可无限增殖,适合长期研究和规模化实验(如
HEK293
、HeLa细胞系)。可能因长期传代发生遗传漂变,与原代细胞的特性产生差异。获取渠道广、难度低、成本低。生物学特性差异01原代细胞完整保留...
毕合生物2024
2026-01-25 07:14
生物科学
蛋白质提取的基础:裂解液的核心作用与重要性
完全裂解后应看不到完整细胞结构BCA/Bradford测蛋白:测定裂解后的蛋白浓度,与预期值比较(例如,10?个
HEK293
细胞完全裂解后蛋白含量约为100-150μg)毕合生物('www.bihebio.com)'提供...
毕合生物2024
2026-01-21 07:55
生物科学
一文了解基因敲除细胞系:概念、构建流程、应用场景、FAQ
构建含靶点序列的编辑载体(如sgRNA载体+Cas9蛋白/载体),通过转染(脂质体转染、电穿孔)或病毒感染(慢病毒、腺病毒)的方式,将编辑工具导入宿主细胞(常见如
HEK293
T、Hela、RAW264.7等...
我太秀了
2025-12-23 08:33
生物科学
细胞培养血清怎么选择?胎牛血清/新生牛血清/小牛血清的区别与...
细胞培养时血清含量并不是越高越好的,需要根据细胞类型和实验目的进行调整:常规传代细胞如
HEK293
、Hela一般添加10%血清即可,原代或干细胞等难培养的细胞可提升至15%~20%,过高浓度血清...
科研战神来了
2025-12-22 08:25
文献求助
文献求助Inducible protein expression in ...mediated stable
HEK
SabineSuppmannChapterFifteen-InducibleproteinexpressioninpiggyBactransposasemediatedstableHEK
293
cellpoolsELSEVIER2021321-33910.1016/bs.mie.2021.06.016
Silence92
2025-12-13 07:36
生物材料
仿生蚕丝蛋白修饰,开发出具有卓越机械性能和长期生物分子稳定性...
图4DMN的机械性能载有稳定剂的各种蚕丝DMN贴片的生物相容性如图5所示,用各种微针对
HEK293
细胞进行24和48小时的活死染色图像,显示所有MS-DMN组的细胞活力超过70%。
HEK293
细胞的肌动蛋白鬼...
医用蚕丝科技
2025-11-26 01:10
生物科学
细胞系构建系列:点突变细胞系构建流程及重点难点
选对转染方法:贴壁细胞(比如
HEK293
T细胞)优先用脂质体转染,操作简单;悬浮细胞(比如JurkatE6.1细胞)优先用电转染,效率更高。如果不确定,可先做“预实验”——用两种方法分别转染,...
我太秀了
2025-11-11 07:24
生物科学
“基因敲入”是什么?这篇超全科普指南,让你彻底搞懂!
如果是容易转染的细胞(如
HEK293
细胞),用质粒载体更方便、成本更低。4.细胞状态:“受体”要健康有活力细胞就像“受体”,如果本身状态不好(比如老化、污染、密度过高),即使“工具”送...
我太秀了
2025-11-05 09:04
生物科学
基因敲除实验优化策略:提升一次成功率
2.编辑系统与载体选择对于常规永生化细胞系(如
hek293
、hct116),质粒载体转染即可满足需求。难转染细胞(如神经细胞)适合使用慢病毒载体(可实现稳定表达)或rnp递送(避免dna整合相关...
我太秀了
2025-08-26 02:11
硕博家园
求交换pDC细胞
一定是pDC其他DCs不太行!我有293T,
HEK293
,293A,SY5Y,RGC5,HUVEC,Hela(RC32),THP-1,ARPE19,ERI-Rb,CHO这些细胞!
任吾飘渺
2025-07-15 08:33
生物科学
细胞也懂“轻断食”?饿一饿,实验结果原地起飞!
HEK293
T饿一晚,转染效率从30%飙到80%,连难搞的悬浮细胞都服软。4??信号通路背景清零,磷酸化蛋白一眼看清血清里的生长因子会“污染”信号通路。先饿12h让细胞静息,再加EGF/胰岛素刺激...
毕合生物2024
2025-07-15 05:33
休闲灌水
细胞衰老模型建立实验流程
细胞系:选择易于培养且具有明确衰老特征的细胞,如人胚肺成纤维细胞(MRC-5)、
HEK293
、HUVEC等。2.?试剂:基础培养基(如DMEM、MEM)、胎牛血清(FBS)、青霉素-链霉素双抗。衰老诱导试剂...
乐奥贝(实验外
2025-05-18 11:30
生物科学
细胞传代次数:你真的算对了吗?
特别是那些永生化的细胞系,比如HeLa、
HEK293
这些,它们虽然能一直长下去,但时间长了,基因可能会不稳定,细胞群也会发生变化。原代细胞就更娇气了,传代几次就可能“老”了。所以,记录传...
毕合生物2024
2025-05-14 08:36
生物科学
THP-1基因敲除细胞:开启免疫与炎症研究新纪元
2.慢病毒制备与细胞感染:使用
HEK293
T细胞进行病毒包装,优化感染MOI并借助Polybrene提高感染效率;3.筛选与单克隆扩增:利用抗生素筛选获得Cas9稳定表达株及sgRNA阳性克隆,并进行单细胞...
我太秀了
2025-05-13 02:44
生物科学
如何高效应用荧光素酶报告?从设计到检测的全流程解析
(一般无特殊要求的情况下,选择易转染细胞如
HEK293
T、HepG2、HeLa等);②根据使用的载体类型,选择的转染方式会存在不同:像PiggyBac载体可使用脂质体转染或电穿孔;若使用病毒载体需先...
我太秀了
2025-04-17 02:16
绿色求助(高悬赏)
Kozak序列+4G提高绿色荧光蛋白在
HEK293
细胞中的表达
杜明梅,叶玲,刘建伟,刘静,杨立娜Kozak序列+4G提高绿色荧光蛋白在
HEK293
细胞中的表达-https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=33a83f331eed47a72a9e99eb9fb7c183&...
axian1
2025-03-06 12:31
生物科学
萤火虫荧光素酶检测试剂盒常用样本类型
萤火虫荧光素酶检测试剂盒的常用样本类型主要有以下几种:细胞样本?贴壁细胞:如HeLa细胞、
HEK
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293
T细胞等13。在实验中,通常需要先将细胞培养在合适的培养容器中,如培养皿、细胞培养板等...
Abbkine亚科因
2025-02-14 08:05
生物科学
结构生物学申博
硕士学习期间长期通过大肠杆菌(可溶性和包涵体)和哺乳动物细胞
Hek293
细胞系表达并纯化蛋白?目前以共一的身份《DesignofaFGF23...
哈哈哈xc
2024-12-15 02:40
考博
结构生物学申博
本人研三,温州医科大学&瓯江实验室联合培养,师从于...硕士学习期间长期通过大肠杆菌(可溶性和包涵体)和哺乳动物细胞
Hek293
细胞系表达并纯化蛋白目前以共一的身份《DesignofaFGF23...
哈哈哈xc
2024-12-15 10:05
文献求助
A rapid procedure to generate stably transfected
HEK293
...
ShantoshiniDash1,OmarFarnós1,ZeyuYang1,AyyappasamySudalaiyadumPerumal1,ArapidproceduretogeneratestablytransfectedHEK
293
suspensioncellsforrecombinantproteinmanufacturing:...
lyl0718
2024-12-02 01:09
文献求助
Inducible protein expression in piggyBac ...stable
HEK293
cell
SabineSuppmann1InducibleproteinexpressioninpiggyBactransposasemediatedstableHEK
293
cellpoolsMethodsEnzymol.2021:660:321-339.doi:10.1016/bs.mie.2021.06.016....
lyl0718
2024-11-27 02:19
文献求助
Development of stable
HEK293
T cell pools expressing CSFV E2 ...
YanminZhang1,DaoyuanNa1,WeijianZhang1,XupingLiu2,ShiweiMiao3,Wen-SongTan1,LiangZhao4DevelopmentofstableHEK
293
TcellpoolsexpressingCSFVE2protein:...41(9):1573-1583.doi:10.1016/j....
lyl0718
2024-11-25 02:54
生物科学
荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
2慢病毒的包被、浓缩
HEK293
T细胞常规培养于高糖DMEM培养基中,于37℃恒温,5%CO2的培养箱中培养。选择生长状态良好的
HEK293
T细胞,于10cm培养皿接种约4×1000000胞,12~16h后达到70%~80%...
YX科研小助理
2024-09-03 05:09
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