转录水平：rt-qpcr检测mrna表达量，评估基因沉默效果。蛋白水平：westernblot定量或免疫荧光检测，直观确认蛋白是否失...低效率：使用gfp报告系统预评估导入效率，必要时调整moi或更换sgrna。...

RNA干扰研究RNAi，即RNA干扰，是生物进化中产生的一种基因沉默，利用双链RNA诱发同源mRNA降解的一种现象。...结果显示，产生的42%的幼鼠携带GFP基因，对小鼠不同组织进行切片检测，GFP荧光基因...

各位高手向您求助：我想要GFP（绿色荧光蛋白）、YFP（黄色荧光蛋白）、CFTR这几个基因（蛋白质）的氨基酸序列、mRNA序列和由RNA逆转录的cDNA序列。我的邮箱：'ahjkkjhaqq.com'转行了，很久...

原核基因可以直接在大肠杆菌中表达出来，真核基因含有内含子，大肠杆菌不能对mRNA进行剪切形成成熟的mRNA，因此，真核基因一般以...BL21、Rosetta等标签：His、GST、MBP、SUMO、FLAG、GFP、...

连接GFP的目的基因，通过瞬时表达检测不到GFP荧光，是怎么回事呢？（其中GFP在mRNA水平高表达了）求大佬赐教！

首先从mRNA水平分离并获得这些基因的完全编码区序列信息，并对这些基因进行免疫相关多组织转录表达水平的...构建目的基因和绿色荧光报告基因GFP的融合表达载体，转染示踪进行细胞水平的验证；...

GFP融合蛋白，能看到荧光，但westernblot检测不到这是为什么？RT-qPCR结果：GFP与目的蛋白mRNA水平一样但IB检测不到

为了监视蛋白质的翻译进程，研究人员在mRNA终止子前方加上一段茎环序列——这个发夹状的序列能够结合带有细胞核定位信号的绿色荧光蛋白（GFP）。而在终止子后面，研究人员则加上一段序列，...

siRNA转染进入细胞后可以通过破坏mRNA从而抑制GFP的表达。但是在加入siRNA之前，不是已经存在表达的GFP了吗？在488nm激发光下观察到GFP的荧光降低是为什么？已经表达了的GFP是如何消失的？

现在需要做一个siRNA沉默细胞中GFP实验。siRNA需要根据对应的GFPmRNA来设计，请问这个GFPmRNA的信息应该从哪里获知？我在购买GFP转染的Hela细胞时，发过来的细胞信息上面没有对应的信息。

protein(GFP)viralvectorandsinglecellswereFACSsortedintoindividualwellsofa96-wellplate.AlkalinephosphataseandperiodicacidSchiff’sstainingAlkaline...

随后利用病毒转染系统（带GFP）进行稳转，real-timePCR检验mRNA水平过表达100倍。但压蛋白为什么没有显示过表达呢。抗体用了GFP的，还有目的基因本身的均显示没有过表达。而压其下游的一些...

还有如果我想把GFP连接到这个蛋白后面，是不是应该把信号肽连接在GFP后面啊？请问用什么表达载体呢？我想构建稳定...克隆这个蛋白的时候是克隆CDS还是克隆mRNA（比较CDS多了3‘UTR和5’UTR）？...

还有如果我想把GFP连接到这个蛋白后面，是不是应该把信号肽连接在GFP后面啊？请问用什么表达载体呢？我想构建稳定...克隆这个蛋白的时候是克隆CDS还是克隆mRNA（比较CDS多了3‘UTR和5’UTR）？...

需要注意的是，由于双链siRNA中的正义链不参与对靶mRNA的识别，所以正义链的3′端突出碱基可以用dTdT替代，但是反义链3′端突出...3.GFPsiRNA中，5’-GACGUAAACGGCCACAAGUUC-3‘antisense,...

在揭开编码蛋白质的信使RNA(mRNA)...鉴于GFP蛋白在细胞内蛋白质功能研究中的广泛应用，Jaffrey研究小组提出了一个奇妙的设想：能否开发出一种具有GFP相似功能的荧光RNA复合物，用于细胞内RNAs...