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新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌过表达酶已有1人参与

使用BL21作为表达菌株,pet-28b(+)作为表达载体,过表达一个酶。第一次质粒转化时酶表达了,活性也有,但后面使用这次质粒转化所做甘油菌进行发酵时,酶的表达量越来越少,第四次时已经基本没有表达了。求问可能是什么原因,以及有什么解决方法?

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KM石头

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

小冀-: 应助指数+1 2023-07-19 11:07:17
多传几代,看一下质粒稳定性,是不是稳定性不好,质粒不断丢失;如果是丢失的话,可以考虑换一种大肠杆菌
2楼2023-07-17 16:06:59
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